吴文新，刘惠民，崔爱荣，崔晋峰，张杰英，张祥宏

    在大肠癌的“腺瘤-癌演进学说”中，细胞增殖与凋亡失衡是大肠癌发生的重要机制。Livin作为新发现的凋亡抑制蛋白，其异常高表达能抑制细胞凋亡，促进细胞异常增生并向恶性转化[1-2]。Caspase-3是细胞凋亡中的关键蛋白酶，它通过级联反应介导细胞凋亡。目前，关于Livin和Caspase-3在肿瘤中表达的研究国内外已有报道[3-4]，但Livin与Caspase-3在散发性大肠管状腺瘤癌变过程中的可能作用少有报道。本研究采用免疫组化法检测了118例散发性大肠管状腺瘤伴上皮不同程度异型增生及癌变组织中Livin和Caspase-3的表达情况，并研究两者的关系，以探讨Livin和Caspase-3在大肠管状腺瘤癌变中的作用。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取我院病理科2004年12月—2009年12月切除的散发性大肠管状腺瘤存档蜡块，由两位高年资病理医师对全部切片进行复诊。诊断为大肠管状腺瘤及癌变的组织118例，其中大肠管状腺瘤伴轻、中、重度异型增生及癌变病例分别为30、33、26和29例。同时选取25例正常大肠黏膜作对照。

    1.2 免疫组化染色方法 采用免疫组化SP法对所有组织进行染色。实验按照说明书操作，兔抗人Livin多克隆抗体为Nanspec公司产品，稀释浓度为1∶150，兔抗人Caspase-3多克隆抗体为Santa Cruz公司产品，稀释浓度为1∶100，以磷酸盐缓冲液 (PBS)替代一抗作为阴性对照。

    1.3 结果判定 Livin和Caspase-3阳性表达主要定位于细胞质，染色结果根据染色强度和阳性细胞百分比进行综合计分。即随机选取5个高倍镜视野计数阳性细胞百分比的平均数，阳性细胞百分比<5%、5% ～35%、36% ～70%和>70%时分别计为0、1、2、3分;染色强度以多数阳性细胞呈现的染色计分 ......