马艳会，刘揆亮，刘 红，王沧海，张 颖，吴 静

    碱性螺旋-环-螺旋 (bHLH)转录调控因子是细胞生长过程中重要的调控因子，具有调节细胞周期、细胞分化等作用。分化抑制因子 (inhibitor of DNA binding/differentiation，Id)蛋白家族包括Id1、Id2、Id3、Id4，属于HLH蛋白家族，因缺乏与DNA结合区域而对HLH转录因子起负性调节作用，具有调控细胞定向分化、促进肿瘤细胞增殖、抑制细胞凋亡、促进血管形成及肿瘤浸润等作用[1]。Id蛋白家族成员具有相互重叠的作用，同时也有各自独特的生物学作用。Id1在肿瘤中发挥的生物学作用已得到普遍认可，但目前国内关于Id3蛋白对消化道肿瘤尤其是大肠肿瘤发生、发展的报道较少，因此本研究采用免疫组织化学二步法 (EnVision System)检测Id3在正常大肠黏膜组织、大肠腺瘤及散发性大肠腺癌中的表达，分析其与各临床病理特征的相关性，探讨Id3在人散发性大肠腺癌发生、发展中的作用及其临床意义。

    1 材料与方法

    1.1 材料收集 首都医科大学附属北京世纪坛医院2009年1月—2010年1月临床资料完整且保存完好的18例患者的正常大肠黏膜组织，30例患者的大肠腺瘤组织，35例患者的散发性大肠腺癌石蜡标本，患者年龄28～73岁，平均48.5岁。患者术前均未进行放化疗及生物免疫治疗。

    1.2 方法 检测采用EnVision System，试剂盒购自丹麦DAKO公司，操作步骤严格按照说明进行。兔抗人Id3单克隆抗体 (浓缩型)购自abcam(英国)，产品编号ab41834。所有标本经苏木紫-伊红 (Hematoxylin-eosin，HE)染色观察再次证实其病理性质，PBS代替一抗做阴性对照。由两位经验丰富的病理学医师双盲读片，结果取平均值。

    1.3 免疫组织化学结果观察及判断标准 对Id3蛋白染色片进行半定量分析，分值A为染色评分:无着色计0分，浅棕黄色计1分，棕黄色计2分，深棕黄色计3分;同时随机选择5个高倍镜视野，计数癌细胞总数和阳性细胞个数，得出细胞阳性率，为分值B，<10%计0分，10% ～25%计1分，26%～50%计2分，51% ～75%计3分，>75%计4分。分值A与分值B之和即为该肿瘤细胞的染色指数评分，0～2分定义为阴性表达，3～7分定义为阳性表达。

    1.4 统计学方法 应用SPSS 11.0统计软件包进行分析 ......