刘焕星，曹 平

    哮喘是一种慢性呼吸系统疾病，它以加剧的气道炎症、气道高反应性及氧化应激为特点[1]。哮喘的发生与炎性细胞，包括嗜酸粒细胞、肥大细胞、巨噬细胞和辅助性T细胞的浸润有关[2]。已有研究表明，2型辅助性T淋巴细胞通过产生细胞因子介导炎症的级联反应，包括嗜酸粒细胞的募集、IgE和活化氧的产生以及肥大细胞的激活，共同构成气道高反应性的必要递质[3-5]。建立机体对过敏原的特异性耐受，可抑制哮喘的发生与发展。

    树突状细胞 (dendritic cells，DC)是专职的骨髓来源抗原提呈细胞，是一群异源性、异质性的细胞群体。尽管DC是在Steinman[6]研究免疫原性时发现的，这些细胞在维持免疫耐受方面同样发挥了重要作用[7]。新近提出的调节性树突状细胞 (regulatory dendritic cells，rDC)具有负向调节免疫反应的功能，在体内外诱导T细胞低反应性及耐受性。

    我们前期的研究已经证实，肺脏基质细胞培养上清液可以诱导成熟树突状细胞 (mature dendritic cells，mDC)分化发育成一种rDC，其细胞形态学、免疫分子表型表达、细胞因子分泌都不同于mDC，缺乏活化T细胞的重要信号[8]。本实验利用这种rDC的致耐受能力，通过诱导小鼠过敏性哮喘模型，研究其对卵清蛋白 (OVA)激发的气道过敏性炎症的影响及白介素12(IL-12)、IgE表达的变化，探讨其在哮喘中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 rDC的制备 简要的说用含重组小鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子 (rmGM-CSF)(10 ng/ml)、重组小鼠细胞因子白介素4(rmIL-4)(1 ng/ml)的RPMI1640完全培养基与小鼠骨髓细胞共培养8 d，用CD11c磁珠阳性选择CD11c+细胞，脂多糖 (LPS) (1 ng/ml)刺激24 h使其成为mDC，然后用含有50%肺脏基质细胞培养的上清液作为完全培养基共培养1周，得到免疫表型为CD11clowIalowCD11bhigh的rDC[8]。

    1.2 主要试剂及仪器 OVA、LPS等购自Sigma公司;IL-12、IgE ELISA试剂盒购自R＆D公司;rmIL-4、rmGM-CSF购自美国Peprotech公司;普通倒置光学显微镜 (Olympus IX70)，普通光学显微镜 (OlympusCH20)，BIO-RAD 680酶标仪 ......