李 强，莫业和，刘运生

    垂体腺瘤是临床常见的颅内肿瘤，绝大多数呈组织学良性表现，但仍有一部分呈侵袭性生长，导致手术完全切除困难，术后容易复发，目前仍是临床治疗的难点和重点。缺氧诱导因子-1α (hypoxia-inducible factor-1，HIF-1α) 是普遍存在于人和哺乳动物细胞内的缺氧应答调控因子，在调节缺氧诱导的基因表达中发挥重要作用，并且与肿瘤的侵袭和转移密切相关[1]。本研究通过检测HIF-1αmRNA和蛋白在垂体腺瘤中的表达情况，探讨HIF-1αmRNA和蛋白的表达与垂体腺瘤侵袭性的关系。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2006年4—9月中南大学湘雅医院神经外科垂体腺瘤手术标本42例，其中男20例，女22例;年龄16～60岁，平均40.6岁，均经手术和病理学确诊。鞍膈或鞍底硬脑膜送病理学检查，明确是否存在肿瘤细胞浸润。肿瘤最大直径11～20 mm者7例，21～30 mm者14例，31～40 mm者9例，>40 mm者12例。符合下列情况之一者可确定为侵袭性垂体腺瘤:(1)Hardy-Wilson分级为Ⅲ级及Ⅲ级以上和C-E期;(2)Knosp分级3级以上;(3)术中见鞍区骨质破坏，海绵窦内壁穿通，窦内结构被肿瘤包绕;(4)病理证实鞍膈或鞍底硬脑膜有肿瘤细胞侵润。42例患者中侵袭性垂体腺瘤27例 (64.3%)，非侵袭性腺瘤15例 (35.7%)。

    1.2 方法

    1.2.1 标本处理 肿瘤标本均取自肿瘤中心部位。取绿豆大小肿瘤标本数块，0.9%氯化钠溶液洗净积血，立即放入经焦碳酸二乙酯 (DEPC)水处理过的冻存管中，置液氮中保存。

    1.2.2 逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR)检测垂体腺瘤HIF-1αmRNA的表达 Trizol裂解细胞后提取总RNA，取1μl测光密度 (OD)值，DNA消化。使用日本Toyobo公司试剂盒逆转录体系进行cDNA合成。引物 (上海生工生物技术服务有限公司)序列如下:HIF-1α上游:5′-AAA GAC CGT ATG GAA GAC-3′; 下游:5′-CAA AGCGACAGA TAA CAC-3′;β-actin为内参照 ......