张芳婷，万汇涓，李明华，刘晓翌，尹美珺，叶 静，于 洁

    Notch信号通路作为经典的调节细胞增殖和分化的信号转导通路，在一系列生理和病理过程中起着重要作用。近年来研究证实，Notch信号通路参与了鼻咽癌的发生过程，但至今机制仍不明确。探讨其在鼻咽癌发生发展中的作用将为发现鼻咽癌治疗的新靶点提供理论基础。由于非角化性鼻咽癌 (nonkeratin naspharyngeal carcinoma，NK-NPC)是鼻咽癌高发区的主要类型，因此本研究拟通过免疫组化染色与分子生物学技术研究Notch1在鼻咽癌中的表达。

    1 材料与方法

    1.1 材料 CNE1、CNE2鼻咽癌细胞株购自深圳欣海凌生物科技有限公司，SUNE-1、SUNE-1亚株5-8F、SUNE-1亚株6-10B及SUNE-1亚株9-4E鼻咽癌细胞株购自湘雅医学院细胞中心，52个NK-NPC标本以及10例鼻黏膜炎症标本来源于北京大学深圳医院耳鼻喉科，由北京大学深圳医院病理科提供。

    1.2 试剂 1640培养基 (GIBCO公司)、胎牛血清 (FBS，GIBCO公司)、磷酸盐缓冲液 (PBS，GIBCO公司)、胰蛋白酶 (AMRESCO公司)、青链霉素(双抗100×，Hyclone)、台盼蓝 (SIGMA公司)。RNA提取试剂盒 (QIAGEN)，cDNA反转录试剂盒 (Fermentas)，单克隆抗人Notch1 IC抗体 (RD)，即用型免疫组化Elivision TM super试剂盒 (迈新生物技术开发有限公司);RNA提取试剂盒 (Qiagen公司);RT-PCR试剂(Fermentas公司);DNA Maker I(Tiangen公司);人Notch1引物由上海生工生物工程技术有限公司合成 ......