许燕艳，翟凤钰，王亚帝，岳 莉，漆起贵，王 芳

    MDA-MB-231细胞是三阴乳腺癌 (TNBC)中的一种细胞系，因其发病年龄早、预后差、极易发生侵袭转移的特点，成为乳腺癌患者死亡的主要原因。由于内分泌治疗和针对原癌基因人类表皮生长因子受体2(human epidermalgrowth factor receptor-2，Her-2)的靶向治疗对TNBC无效，至今对TNBC仍缺乏令人满意的综合治疗方案，故在临床上积极发掘对TNBC有效的治疗方案是非常必要的。研究表明，TNBC对以紫杉类为主的联合化疗比较敏感，容易获得临床完全缓解率(cCR)和病理完全缓解率 (pCR)，获得cCR、pCR的患者有很好的远期生存[1]。多西他赛是一种半合成的紫杉类药物，对于乳腺癌、非小细胞肺癌和其他多数肿瘤都具有抗癌活性，是治疗转移性乳腺癌最有效的单药之一[2]，但多西他赛在临床应用中发挥抗肿瘤作用的同时常会伴随一系列药物毒副作用，如骨髓抑制等。有研究已证实，低毒药物与化疗药物的联合应用可通过减少化疗药物的使用剂量而减轻对人体的毒副作用，同时又不会影响药物的抗肿瘤作用，甚至能够增加化疗药物对肿瘤细胞的敏感性[3]。塞来昔布是一种环氧合酶 -2(COX-2)抑制剂，具有预防和抑制肿瘤的作用。本研究采用塞来昔布联合多西他赛作用于人乳腺癌MDA-MB-231细胞，观察两药联合在体外对乳腺癌细胞增殖抑制和诱导凋亡的作用，并探讨其可能存在的分子机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞株 乳腺癌MDA-MB-231细胞来自中国科学院上海生科院细胞库。

    1.1.2 主要试剂 RPMI1640培养液、碘化丙锭 (PI)购于Sigma公司;新生胎牛血清、胰蛋白酶购于北京博奥森生物工程有限公司;兔抗人bcl-2、bax、survivin单克隆抗体购于Santa Cruz公司;多西他赛购于江苏恒瑞医药股份有限公司;塞来昔布购于辉瑞制药股份有限公司;四甲基偶氮唑蓝(MTT)购于北京华美公司;羊抗兔辣根过氧化物酶标记的二抗购于北京中杉金桥生物技术有限公司。

    1.1.3 主要仪器 恒温二氧化碳培养箱 (SHELL LAB公司，美国)，倒置显微镜 (Olympus公司，日本)，净化工作台(江苏吴县市净化技术研究所，江苏)。

    1.2 方法

    1.2.1 细胞培养 将人乳腺癌MDA-MB-231细胞置于含10%胎牛血清 (灭活)的RPMI 1640培养液中，37℃、5%二氧化碳 (CO2)饱和湿度的培养箱内传代培养 ......