孔令韬，胡 贤，吴 枫，汤艳清

    名词解释开场试验：开场试验是通过测量动物进入开阔环境后的各种行为，来观察研究动物神经精神变化情况，被广泛应用于动物行为学、脑功能及药物对动物行为影响等方面的研究。在开场试验箱中，试验箱场地被划分成数个固定大小的开场格，动物被放入箱内后由于对新环境的恐惧和其探究本性会在箱中不断活动和探索，可以通过对其相关行为的评估来评价动物抑郁或焦虑情绪。

    抑郁症是以心境低落、思维迟缓、认知功能损害、意志活动减退和躯体症状为主要临床表现的常见精神疾病[1]。尽管近年来抑郁症在治疗方面已经取得了很大进展，但是对抑郁症发病的生物学基础及抗抑郁药物起效的具体机制等仍不清楚。应激性生活事件被认为是导致抑郁症发病的高风险因素[2]，海马作为介导应激反应的重要脑区，发现其在抑郁症患者中存在结构和功能上异常[3-4]。有研究表明，抑郁症患者存在海马神经元体积和密度的降低[5]，认为可能与应激导致的海马神经元损伤和凋亡增加有关[6]。近年来，碳酸锂作为抗抑郁药物的增效剂被应用于难治性抑郁症的治疗并取得良好效果，但其作用的分子机制仍不十分清楚。有研究认为，碳酸锂可能通过上调中枢神经系统中抗凋亡蛋白B细胞淋巴瘤/白血病-2(B cell lymphoma/lewkmia-2，Bcl-2)的表达发挥其抗抑郁作用[7]。本研究拟进一步观察与凋亡密切相关的两种蛋白Bcl-2和细胞色素C在慢性应激性抑郁模型大鼠海马中的表达及碳酸锂对其影响，探讨海马神经元凋亡在抑郁症发病机制中的作用及抗抑郁药物的部分作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 实验动物 普通级青年雄性Wistar大鼠45只，2～3月龄，体质量180～220 g，健康状况良好，由中国医科大学实验动物中心提供，合格证号：SYXK(辽)2003-0013。饲养条件：自由饮食水，光暗周期为12/12 h,实验前适应性饲养1周。用随机排列表法分为3组(每组15只)：正常对照组、抑郁模型组和碳酸锂组。

    1.1.2 主要试剂 小鼠抗大鼠Bcl-2抗体(Santa Cruz Co.)，兔抗大鼠细胞色素C抗体(武汉博士德生物工程有限公司)，生物素标记的兔抗小鼠IgG，山羊抗兔IgG，ECL试剂盒(Santa Cruz Co.)。

    1.2 方法

    1.2.1 动物模型制备 入组后第1～21天，对照组大鼠正常饲养；模型组和碳酸锂组大鼠随机接受7种不同的刺激：电击足底(30～40 V,20 s/次，间隔1 min，共20次)；强迫游泳(水温20 ℃,5 min)；夹尾(1 min)；摇晃(水平往复 ......