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编号:1088289
自发性高血压大鼠血清脂联素和心肌脂联素受体1的表达及胰岛素抵抗程度与心室重构的关系研究
http://www.100md.com 2013年4月19日 中国全科医学 2013年第12期
左心室,1动物与方法,2结果,3讨论
     孙 蕊,刘雅娟,孙红茜,秦 毅,杨锐英

    高血压(EH)是一种严重危害人类健康的常见病、多发病,而左心室肥厚和扩大是EH心室重构的主要表现。脂联素(APN)是由白色脂肪细胞分泌的一种细胞因子,可以与心肌组织上分布的APN受体结合,发挥其增敏胰岛素、预防心肌细胞肥大、抗动脉粥样硬化等作用[1-2]。本研究旨在观察自发性高血压大鼠(SHR)血清APN及心肌脂联素受体1(AdipoR1)的表达,探讨APN及其受体与EH及EH心室重构之间的关系,为APN预防或延缓EH以及其靶器官损害的发生、发展提供理论依据。

    1 动物与方法

    1.1 实验动物 22周龄雄性SHR大鼠(SHR组)及其同系正常对照Wistar-Kyoto(WKY)大鼠(WKY组)各8只,购自北京维通利华实验动物技术有限公司,合格证编号SCXK(京)2012-0001。普通光照环境中饲养,自由进食水。

    1.2 标本收集 处死动物前1 d禁食水12 h,电子秤称体质量(BW),采用北京软隆公司BP-98A智能无创血压计测量尾动脉收缩压(SBP)。次日清晨,尾尖采血测定空腹血糖(FBG)。腹腔注射10%水合氯醛以麻醉大鼠,迅速开胸,由腹主动脉穿刺取血5 ml,2 h内以3 000 r/min离心10 min,分离血清。迅速取出心脏,称全心重量(HW);保留大鼠左心室游离壁和室间隔作为左心室重量(LVW)。取部分心肌组织,置于4%多聚甲醛中固定,以备做组织形态学检查,剩余组织立即转存于-80 ℃冰箱,用以做实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)检测。

    1.3 指标测定

    1.3.1 生化指标测定 FBG测定,采用强生One Touch Ultra系列血糖仪测定;空腹胰岛素(FINS)测定,采用放射免疫法,试剂盒购于北京原子高科股份有限公司;计算胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)=(FBG×FINS)/22.5。

    1.3.2 心室肥厚指标测定 计算心脏重量指数(HWI)和左心室重量指数(LVWI),HWI=HW/BW,LVWI=LVW/BW,以HWI和LVWI作为判断心室肥厚的指标。

    1.3.3 心肌组织形态学观察 将固定好的心肌组织标本进行石蜡包埋,HE染色,光镜下观察心肌细胞形态。

    1.3.4 血清学指标测定 血清APN测定采用酶联免疫法,试剂盒购于美国R&D公司。

    1.3.5 免疫组织化学法检测心肌AdipoR1分布及蛋白表达 将心肌组织石蜡切片在二甲苯及降序梯度乙醇溶液中常规脱蜡至水,过氧化氢(H2O2)灭活内源性过氧化物酶 ......

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