卢玉娟，张红岩，代素梅，黎 杰，张 志

    食管癌是危害人类生命和健康的严重疾病之一，在全世界范围内的发病率和病死率均较高。虽然临床上治疗食管癌的技术不断改善和提高，但是总体上的疗效并不令人满意。目前，食管癌的病因及发病机制尚不完全清楚。研究表明，饮食因素和环境因素是我国食管鳞癌的最主要危险因素，吸烟是重要的环境致癌因素，在食管癌的发生发展中起重要作用；近年来分子流行病学研究提示，基因多态性也是肿瘤个体易患因素[1-2]。

    环氧化酶2(COX-2)是花生四烯酸代谢的关键酶，COX-2的高表达与包括食管癌在内的多种肿瘤的发生密切相关[3-6]。机体在正常情况下，COX-2的表达是被精确控制的，而在恶性转化细胞COX-2的表达调控能力发生了改变；COX-2基因转录调节缺失及其后发生的mRNA降解失调均可导致COX-2的表达增高[7-8]，进而增强肿瘤生长及侵袭转移能力。研究发现，COX-2 3′非翻译区(UTR)+8473T>C基因多态性与乳腺癌、非小细胞肺癌的发病风险增加密切相关[9-10]，已知幽门螺杆菌在食管癌的发生发展中起重要作用，且幽门螺杆菌感染可诱导COX-2表达。本研究采用病例对照研究方法探讨COX-2 3′UTR+8473T>C基因多态性及其与吸烟、幽门螺杆菌感染的交互作用对食管癌发病的影响。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 选择2006年1月—2011年1月在唐山市工人医院进行治疗的食管癌患者119例为病例组，均经组织病理学检查确诊，术前未进行放化疗；按照2∶1比例选择同期体检正常者238例为对照组，均无肿瘤病史和体征。按照美国肿瘤联合会(AJCC)2002年制定的肿瘤TNM分期标准，病例组患者中Ⅰ期20例、Ⅱ期37例、Ⅲ期55例、Ⅳ期7例。

    1.2 方法

    1.2.1 基因分型 COX-2 3′UTR+8473T>C基因多态性的基因分型采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术(PCR-RFLP)进行。具体如下：扩增3′UTR含8473C/T多态性位点的引物为u8473F 5′-GTT TGA AAT TTT AAA GTA CTT TTG AT-3′和u8473R 5′-GAC ATG AAA TTA CTG GTA ATG TCT-3′，产物长度为110 bp。限制性核酸内切酶 BclⅠ(New England Biolabs，MA)用于 8473C→T多态性位点的基因型分析。酶切在10 μl反应体系中进行，其中含8 μl 聚合酶链反应(PCR)产物、1×反应缓冲液和3 U相应核酸内切酶 ......