赵 群，李 勇，范立侨，檀碧波，侯五辉，李兆星，王 冬，刘 羽

    侵袭转移是胃癌演进过程中多步骤、多因素参与的复杂过程，也是造成胃癌患者预后差的最主要原因[1-2]。侵袭转移与多种基因有关，锌指蛋白 (ZNF)家族成员对多种基因的转录调控发挥着重要作用[3-4]。笔者前期研究发现，锌指蛋白139(ZNF139)作为ZNF家族中的一员，与胃癌细胞分化程度密切相关[5]。目前，关于ZNF139在胃癌细胞侵袭转移中作用机制的研究报道较少，研究胃癌侵袭转移的体内模型对于模拟胃癌转移过程也还不令人满意。因此，本研究通过建立人胃癌细胞原位移植转移裸鼠模型模拟胃癌在体内的转移过程，检测ZNF139在胃癌原发灶及转移组织中的表达，同时检测与胃癌细胞侵袭转移能力直接相关的基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)的表达，并对其关系进行分析，旨在对胃癌侵袭转移的调控机制进行初步探讨。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 兔抗人ZNF139单克隆抗体为美国Sigma公司产品，鼠抗人MMP-2、MMP-7单克隆抗体购自美国Santa Cruz公司，Trizol Reagent、引物均购自美国 Invitrogen公司，cDNA合成试剂盒为美国Fermentas公司生产，免疫组织化学S-P染色试剂盒、二氨基联苯胺 (DAB)显色剂购自北京中杉金桥生物有限公司，人胃癌细胞株SGC7901购自中科院上海细胞所。实验动物:4周龄BALB/C雄性裸鼠44只，体质量18～25 g，平均 (22.4±4.4)g，均购自北京华阜康生物科技股份有限公司，合格证号:0221950。

    1.2 细胞培养 人胃癌细胞株SGC7901常规进行细胞复苏、传代，调节细胞浓度，取对数生长期细胞进行实验。

    1.3 裸鼠饲养 裸鼠在河北医科大学第四医院动物中心无特定病原体 (SPF)条件下的动物实验室进行分笼标准饲料喂养，其中14只裸鼠用于皮下移植瘤鼠间传代，30只用于建立原位移植转移模型。

    1.4 人胃癌细胞株SGC7901裸鼠移植瘤的建立

    1.4.1 皮下移植瘤模型建立 取细胞浓度至少为3.5×105个/ml的细胞悬液0.2 ml，注射于2只裸鼠背部，接种约3周后瘤体生长至直径约1 cm时剥取瘤体，清除纤维包膜，浸泡在培养基内将其切成1 mm×1 mm×1 mm小组织块，切开其他未荷瘤裸鼠背部皮肤，将小组织块植入后缝合皮肤，饲养约3周后移植瘤生长至直径1 cm时再行取瘤接种，此过程反复6次，获得可在裸鼠体内稳定生长的胃癌细胞株SGC7901实体瘤组织块 ......