支原体肺炎患儿肺泡表面活性物质蛋白A基因多态性研究
1资料与方法,2结果,3讨论
许明峰,冯罗华,潘乐英,吴 晔支原体肺炎(MP)是肺炎支原体引起的一种间质性肺炎,常见于5岁以上儿童,近年来其发病率呈不断上升趋势[1-2],且多见婴幼儿感染。肺泡表面活性物质相关蛋白(SP)是由肺泡2型细胞分泌产生的[3],其中肺泡表面活性物质蛋白A(SP-A)是目前研究最多的一种,其作为生物学标志在肺部疾病中有着重要意义[4]。本研究通过检测MP患儿及非MP患儿的血样,测定SP-A基因序列,比较rs1059054、rs1136452及rs1136454位点的基因多态性,旨在探讨SP-A基因多态性与MP患儿易感性的关系,现报道如下。
1 资料与方法
1.1一般资料选择2011年1—12月在我院住院的MP患儿100例为病例组,其中男58例,女42例;年龄6个月~14周岁;诊断依据卫生部2009年版儿科临床路径中儿童MP临床路径:临床症状及胸部X线片、胸部CT检查诊断为肺炎,咽拭子肺炎支原体分离培养阳性,痰培养无其他细菌生长。选择同期在我院住院的非MP患儿100例为对照组,其中男63例,女37例;年龄13个月~14周岁;咽拭子肺炎支原体分离培养均为阴性,痰培养有或无其他细菌生长。
1.2方法
1.2.1标本采集两组患儿入院明确诊断后抽取血液标本,柠檬酸钠抗凝,采用Ezup柱式血液基因组DNA抽提试剂盒提取DNA,-70 ℃保存备用;试剂盒由生工生物工程(上海)股份有限公司提供。
1.2.2聚合酶链反应(PCR)rs1059054位点上游引物为CTGGAGCCCCTGGTATCCCTGGAGAG,下游引物为GTGGAGAGAAGGGGGAGCCTGGCGA;rs1136452位点上游引物为CTGGAGAGTGTGGAGAGAAGGGGGAG,下游引物为CTGGCGAGAGGGGCCCTCCAGGTGA;rs1136454位点上游引物为GGAGAGAAGGGGGAGCCTGGCGAGAG ......
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