赵 杰，赵丽娜，赵 静，张秀军

    桥本甲状腺炎(Hashimoto′s thyroiditis，HT)是一种器官特异性自身免疫性疾病，以对甲状腺抗原的免疫应答和甲状腺腺体内的淋巴细胞浸润为特征，其发病机制涉及细胞免疫和体液免疫的异常。近年来人们逐渐认识到细胞凋亡在HT的发病机制中起着重要的作用。程序性死亡因子5(programmed cell death 5，PDCD5)是一种重要的凋亡调控分子，研究发现PDCD5在凋亡相关疾病如恶性肿瘤及自身免疫性疾病的发病过程中起重要的作用。有研究证实，HT患者甲状腺细胞中PDCD5呈阳性表达[1]。本研究采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法测定了60例HT患者外周血单个核细胞(peripheral blood monouclear cell，PBMC)PDCD5 mRNA的表达情况，探讨PDCD5与HT发生发展的关系。

    1 资料与方法

    1.1一般资料选取华北煤炭医学院附属医院2006年3—8月内分泌门诊或住院HT患者60例(HT组)，其中男8例，女52例；平均年龄(40.2±14.5)岁。根据临床表现、甲状腺功能检测结果、甲状腺核素扫描结果等临床诊断为HT。所选患者均为尚未给予治疗的初诊患者，且无其他自身免疫性疾病、肿瘤及其他内分泌疾病史。根据患者外周血血清中抗甲状腺微粒体抗体(TMAb)水平，将其分为HT1 组(TMAb≤45%)36例和HT2组(TMAb>45%)24例。另选取同期在我院体检的健康者40例(对照组)，其中男5例，女35例；平均年龄(38.1±11.3)岁；均与HT组患者的性别构成、年龄匹配。

    1.2主要试剂淋巴细胞分离液(中国医学科学院血液学研究所)；总RNA提取试剂Trizol(北京天为时代科技有限公司)；莫洛尼鼠白血病病毒反转录酶逆转录试剂盒(Promega Corporation)；2×Taq PCR MasterMix(北京天为时代科技有限公司)；dNTP、Ribonuclease Inhibitor、DL2000(宝生物工程有限公司)。

    1.3方法

    1.3.1淋巴细胞的分离取HT组和对照组肝素抗凝外周血5 ml，按常规Ficoll密度梯度离心分离PBMC。

    1.3.2半定量RT-PCR方法检测PDCD5基因的表达

    1.3.2.1总RNA提取细胞总RNA的提取按Trizol RNA总提取试剂盒说明书进行 ......