段哲萍，于新江，刘媛媛

    当前，肺癌的发病率及死亡率均已高居各类恶性肿瘤之首，且逐年增高，对人类健康造成严重威胁，肿瘤的高转移率和肿瘤细胞的耐药性为其致死的最重要原因，通过何种途径提高疗效、减轻放化疗毒副作用、降低肿瘤的复发和转移已成为肺癌治疗的重中之重[1-2]。大量研究表明，肿瘤细胞的增殖及转移同瘤体内新生血管高度相关，所以抑制瘤体内新生血管生成、切断肿瘤血液的供应，能够抑制肿瘤生长和血行转移[3]。已有研究证明复方苦参注射液可抑制肿瘤的生长与转移，进而改善临床症状，配合放化疗应用具有显著的减毒增效作用[4]。本实验检测复方苦参注射液联合放射治疗对小鼠肺癌Lewis细胞株的肿瘤血管新生及肿瘤细胞增殖、转移的抑制作用，为中药联合放射治疗肺癌提供确实的实验依据。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞株 小鼠肺癌Lewis细胞株，由河北医科大学免疫教研室馈赠，用于建立小鼠肿瘤模型。

    1.1.2 实验动物 6周龄左右、健康SPF级、雄性C57BL/6小鼠60只，体质量20～25 g，来自于河北医科大学实验动物中心，清洁级环境下饲养。

    1.1.3 主要试剂 细胞培养基：DMEM(批号：cat NO 12800-017,lot NO 1164642)、RPMI-1640(批号：cat NO 31800-022,lot NO 688600)、胎牛血清 (优级，批号：130624),购于GIBICO BRL公司。培养基加用丁胺卡那霉素为华北制药股份有限公司产品。复方苦参注射液购自山西振东制药有限公司。

    1.1.4 主要仪器设备 瑞典医科达公司精确治疗系统全数字化直线加速器；日本东芝放射治疗模拟定位机；英国ADAC计算机三维适形放射治疗计划系统；二氧化碳(CO2)培养箱：SANYO；恒温水浴箱:PolyScience or HAAKE DC3；高速离心机5417R，Eppendorf公司，德国；普通高速离心机5415D：Eppendorf公司，德国；微量振荡器MH-1：江苏海门其林贝尔仪器制造有限公司。超净工作台：吴江市净化设备厂。

    1.2 实验方法

    1.2.1 细胞培养 肺癌Lewis细胞株快速复苏后加入含10%胎牛血清的DMEM培养液，置于恒温培养箱中(37 ℃，5%CO2)培养。每日在倒置显微镜下观察，2～3 d更换培养液传代。

    1.2.2 动物模型的制作 取对数生长期肺癌Lewis细胞株，以0.25%胰酶消化，用磷酸盐缓冲液(PBS)将肿瘤细胞自培养瓶壁刮下 ......