余 帆，徐彤彤，佐 妍，吕祥威

    糖尿病作为临床上一种常见的慢性代谢性疾病，其发病率已随着人们生活水平的提高而逐年增加。糖尿病常伴发或并发各种心血管疾病，譬如心肌缺血、心肌梗死及猝死[1-2]。这一高危因素，已逐渐引起学者重视。近年来瘦素与胰岛素抵抗(insulin resistance,IR)在心血管疾病中的作用备受关注[3-4]，目前国内就两者在糖尿病并发心肌缺血再灌注损伤(myocardial ischemic reperfusion injury,MIRI)过程中的相关作用报道较少。本研究旨在通过复制糖尿病大鼠MIRI模型，观察不同剂量外源性瘦素预处理对大鼠血清瘦素、肿瘤坏死因子α(tumor necrosisfactor-alpha,TNF-α)、丙二醛(malondialdehyde,MDA)及胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)的影响，探讨瘦素预处理在糖尿病大鼠MIRI中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物、主要试剂和仪器 (1)实验动物：清洁级SPF雄性SD成年健康大鼠60只，8周龄，体质量170～190 g，由桂林医学院动物实验中心提供，许可证号：SCXK 桂 2013-0001。动物饲养条件：室温18～25 ℃，相对湿度50%～80%的环境下，每天日照时间为8:00-20:00。(2)主要药品和试剂：链脲佐菌素(streptozotocin,STZ，100 mg，美国sigma公司 S0130)，重组瘦素(200 μg,Leptin，美国R&D Systems公司)，MDA、TNF-α酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒(均为100管/96T，南京建成生物工程研究所)，瘦素放射免疫分析盒(100管/96T，中国原子能科学研究所)，125I-胰岛素放射免疫分析药盒(100管/盒，北京科美生物技术有限公司)。(3)主要仪器：血糖仪(罗氏，卓越型)、小型动物呼吸机、Leica显微镜、超声匀浆机、高速离心机、电子秤和BECKMAN全自动生化分析仪。

    1.2 饲料 普通饲料由医学院动物实验中心提供。高糖高脂饲料配方为每100.0 g饲料中含标准饲料粉25.5 g、酵母粉0.5 g、大豆粉10.0 g、食盐0.5 g、猪油15.0 g、蔗糖20.0 g、奶粉10.0 g、麻油5.0 g、蛋黄粉10.0 g、花生10.0 g。将上述配料充分混匀，烤熟压制成形后喂养，此饲料喂养前临时配制。

    1.3 分组方法及模型制备 (1)60只健康大鼠按照随机数字表法分为正常对照组、糖尿病假手术组、糖尿病假手术心肌梗死模型组(心肌梗死组)、糖尿病心肌梗死低剂量瘦素预处理组(低剂量组)、糖尿病心肌梗死中剂量瘦素预处理组(中剂量组)、糖尿病心肌梗死高剂量瘦素预处理组(高剂量组) ......