张 微，张尘玉，杨志强，迟新楠，岳 莉

    乳腺癌是发展中国家女性最常见的恶性肿瘤之一[1]，每年大约有40万女性死于该疾病[2]，其中三阴乳腺癌(triple-negative breast cancer，TNBC)是导致治疗失败和死亡的主要类型。TNBC复发和转移的风险较高[3]，并且容易对蒽环类和紫杉类药物耐药，对激素和靶向治疗也不敏感，这些药物治疗失败后没有更好的解救方案可选择，是目前临床治疗TNBC最大的难题。在过去的几十年里，发达国家乳腺癌的发病率持续上升，而病死率则呈现相对下降的趋势，这得益于良好的医疗环境和体检的常规化。乳腺小黏蛋白(small breast epithelial mucin，SBEM)近几年被认为是乳腺癌患者微转移的分子标志物[4]，在乳腺组织、淋巴结和外周血中检测到乳腺特异性蛋白的表达，可以早期发现乳腺癌微转移、预测肿瘤复发、指导临床用药等。局部黏着斑激酶(focal adhesion kinase，FAK)是一种非受体酪氨酸激酶，在多种恶性肿瘤中高表达或过度激活[5]，其高表达导致肿瘤细胞的黏附状态发生改变，促进肿瘤细胞的侵袭和转移。本研究回顾性分析TNBC患者组织中SBEM和FAK的表达情况，并探讨两者在TNBC中的表达相关性及对预后的影响。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料 收集2005—2007年辽宁医学院附属第一医院术后诊断为乳腺癌的石蜡标本67例，均为女性，年龄35～68岁，平均52岁，患者术前均未接受放化疗及免疫治疗。乳腺癌的诊断和分级参照世界卫生组织(WHO)诊断标准，经两名病理学专家诊断确定TNBC。其中Ⅰ级14例，Ⅱ级29例，Ⅲ级24例；存在淋巴结转移者35例。免疫组化标本经10%福尔马林溶液固定，石蜡包埋。随访从术后第1天开始，主要采用电话、邮件、面谈、门诊随访的方式，每例患者至少随访5年。

    1.2 主要试剂及方法 (1)兔抗人SBEM与FAK多克隆抗体及免疫组化SP试剂盒购自美国R&B公司。免疫组化技术采用三步法，标本常规采用10%福尔马林溶液固定，60 ℃烘烤过夜。脱蜡水化，磷酸盐缓冲液(PBS)冲洗3次，3%过氧化氢(H2O2)室温孵育15 min，PBS冲洗，高压修复1.5 min，加入一抗(浓度1∶100)4 ℃过夜(4 ℃过夜后在37 ℃复温45 min)。PBS冲洗3次，加入二抗室温孵育20 min，PBS冲洗3次，滴加试剂链霉亲和素-生物素复合物(SABC)室温孵育20 min，二氨基联苯胺(DAB)显色，蒸馏水洗，苏木素对比染色 ......