罗格列酮对糖尿病牙周炎大鼠炎症反应的影响研究
牙周组织,1材料与方法,2结果,3讨论
黄 辉牙周炎是一种由于细菌侵犯牙龈和牙周组织而引起的慢性炎症,其主要特征为牙周袋的形成及袋壁的炎症,牙槽骨吸收和牙齿逐渐松动[1]。牙周炎在糖尿病人群中发病率较高[2],已被认为是糖尿病的第六大并发症[3]。罗格列酮通过与过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)结合而发挥作用,除了具有治疗2型糖尿病[4]的功能之外,还可减轻急性、慢性炎症反应[5]。因此,本研究将对罗格列酮在糖尿病牙周炎大鼠牙周组织中的炎症抑制效应进行探讨。
1 材料与方法
1.1 主要药品和试剂 马来酸罗格列酮片(文迪雅)由葛兰素史克(天津)有限公司提供,批号 06070021。试剂链脲佐菌素(批号040103)、GW9662(PPAR-γ特异拮抗剂)购自Sigma公司;细胞间黏附分子1(ICAM-1)及血管细胞黏附分子1(VCAM-1) 酶联免疫吸附测定(ELISA)试剂盒购自美国R&D公司。兔抗人actin多克隆抗体、兔抗人PPAR-γ多克隆抗体、兔抗人核因子κB(NF-κB)多克隆抗体、羊抗兔二抗及ECL显影剂均购自美国Santa Cruz公司。
1.2 动物分组及模型制备 选用纯种雄性6月龄SD大鼠40只(广西医科大学实验动物中心提供),体质量(236±13)g。以随机数字表法随机分为对照组、糖尿病牙周炎组、罗格列酮组及罗格列酮+GW9662组,每组10只。除对照组外,其余各组大鼠按55 mg/kg体质量腹腔一次性注射链脲佐菌素溶液,确定空腹血糖>16.7 mmol/L糖尿病动物模型建立。1周后1%戊巴比妥钠麻醉下用直径0.2 mm的正畸钢丝结扎右侧上颌第一磨牙颈部,并喂黏性食料。结扎术后4周,临床观察见右上颌第一、二磨牙间牙龈红肿糜烂;动物组织学观察发现结合上皮与牙体分离,胶原纤维排列紊乱,牙槽嵴顶破坏吸收,确认牙周炎动物模型建立。糖尿病牙周炎动物模型建立后第1天起,对照组予10%二甲基亚砜(DMSO)2 ml/kg;糖尿病牙周炎组予DMSO 2 ml/kg;罗格列酮组予罗格列酮3 mg/kg,罗格列酮+GW9662组予罗格列酮3 mg/kg+GW9662 0.3 mg/kg,灌胃1次/d,连续1周。1周后处死大鼠,取牙龈组织,称质量,分别用于相关生化指标的检测及免疫组织切片的制备 ......
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