吴建珩，李晓辉，单 峤，李培栋

    脑胶质瘤细胞的侵袭性增长包括细胞黏附、运动及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)降解等诸多过程，所涉及的分子机制十分复杂。星形胶质细胞上调基因1 (astrocyte elevated gene-1，AEG-1)是2002年用改良的快速减数杂交(rapid subtraction hybridization，RaSH)法首次发现1型人类免疫缺陷病毒(HIV-1)感染后星形胶质细胞中表达增高的新基因，该区域也是与人类脑胶质瘤发生高度相关的地带[1]。近些年研究表明，AEG-1与胃癌、乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌等肿瘤的发生发展密切相关，能够促进肿瘤的侵袭和转移[2]。基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMPs)是ECM降解过程中最重要的一类酶，其中MMP-9与脑胶质瘤的侵袭性生长密切相关。目前，国内外对AEG-1和MMP-9在脑胶质瘤中的表达及作用的研究报道较少。本研究通过反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和Western blotting检测AEG-1与MMP-9在不同级别脑胶质瘤组织中的表达情况，分析两者的相关性，并探讨其与脑胶质瘤病理分级的关系。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料 收集2009年5月—2012年6月郑州大学第五附属医院住院的具有明确病理分级的脑胶质瘤标本72例为脑胶质瘤组，患者术前均未行放化疗。按照《2007年WHO中枢神经系统肿瘤组织学分类》[3]标准分级，其中低级别组(Ⅰ～Ⅱ级)32例，男17例、女15例，年龄31～85岁，平均(58.7±5.9)岁；高级别组(Ⅲ～Ⅳ级)40例，男22例、女18例，年龄33～87岁，平均(60.2±6.7)岁。另收集脑创伤行内减压去除的脑组织36例作为对照组。每份标本都分为2份，一份经10%福尔马林固定，另一份取下后立即用液氮冷冻保存。

    1.2 RT-PCR 采用Primer premier 6.0软件设计引物，由上海生工生物工程有限公司合成，AEG-1上游引物：5′-GGCAATTGGGTAGACGAAGA-3′，下游引物：5′-TTGAATTTGGAGGGATCTCG-3′，引物长度426 bp；MMP-9上游引物：5′-TTCCCTGGAGACCTGAGAACC-3′，下游引物：5′-CGACACCAAACTGGATGACGC-3′，引物长度：339 bp；β-actin上游引物：5′-AAGGAAGGCTGGAAGAGTGC-3′ ......