脂肪乳对内毒素诱导急性肺损伤大鼠肺组织白介素6分泌及肺泡上皮细胞凋亡的影响
尤文,1材料与方法,2结果,3讨论
石计朋,黄丽密,尚 云急性肺损伤(ALI)/急性呼吸窘迫综合征(ARDS)指由心源性以外的各种肺内外致病因素导致的急性进行性、缺氧性呼吸衰竭,已成为医院患者死亡的重要原因之一。虽然抗生素能有效杀灭细菌,但不能阻止已经被激活的全身炎性反应。白介素6(IL-6)是急性炎性反应中的一种多功能细胞因子,具有广泛的生物活性和免疫调节作用,近年来,其在ALI/ARDS发病过程中的作用一直为学者们所关注。IL-6主要由肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)刺激巨噬细胞分泌,与TNF-α、IL-1β一起被称作“前炎性细胞因子”。
脂肪乳已普遍应用于危重症患者的肠外营养,多不饱和脂肪酸(PUFAs)是免疫营养的重要组成部分,可以通过多种分子机制调控机体炎症和免疫功能,在多种感染疾病的治疗中具有良好的前景。目前临床上常用的脂肪乳有:(1)ω-3鱼油脂肪乳注射液(尤文),属于ω-3系列,主要有α-亚麻酸、二十碳五烯酸(EPA)、二十二碳六烯酸(DHA)等;(2)脂肪乳注射液(C14~24)(英脱利匹特),属于ω-6系列,主要包括亚油酸、γ-亚麻酸和花生四烯酸(AA);(3)长链脂肪乳注射液(OO)(克林诺),含橄榄油80%、豆油20%,特点是富含ω-9单不饱和脂肪酸(ω-9MUFAs)、低饱和脂肪酸、天然抗氧化剂维生素E等。本研究以ALI大鼠为模型,比较英脱利匹特、克林诺和尤文3种脂肪乳对肺组织IL-6分泌及肺泡上皮细胞凋亡的影响,以期为临床合理使用脂肪乳提供依据。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 实验动物 清洁级幼年雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠100只,体质量在160~180 g,由上海斯莱克动物有限责任公司提供,许可证号:SCXK(沪)2003-0003。大鼠于新乡医学院实验动物中心清洁级实验室内饲养,昼夜照明12 h/12 h,相对湿度70%,饲养温度25 ℃。
1.1.2 脂肪乳 英脱利匹特和尤文均购自上海华瑞制药有限公司,克林诺购自美国Baxter公司。
1.1.3 主要试剂和仪器 原位细胞凋亡试剂盒(德国Roche公司),苏木素染色液(福州迈新生物技术开发有限公司),脂多糖(LPS,大肠埃希菌O111:B4,美国Sigma-Aldrich 公司),总RNA提取试剂(Trizol,上海英骏生物技术有限公司),反转录聚合酶链反应(RT-PCR)试剂盒〔大连宝生物(TaKaRa)公司〕,琼脂糖(上海生工生物工程有限公司);LKB-V2088型超薄切片机(瑞典GERMAN) ......
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