刘佳佳，冯 姝，瞿全新，唐荣荣，李 敏

    宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasia，CIN)是与宫颈浸润癌密切相关的一组癌前病变，反映了宫颈癌发生发展中的连续过程。从CIN发展为宫颈癌一般需要10～15年。因此，高效筛查是早期发现病变、指导及时恰当治疗和随访管理、有效预防宫颈癌发生的关键。目前，宫颈液基薄层细胞学检查(TCT)是宫颈癌筛查中应用最为广泛的方法，但是,该方法不能单独用于区分少数可能进展为浸润癌的病变和绝大多数可能自然消退的病变[1-2]。20世纪70年代德国病毒学家Zur Hausen提出人乳头瘤病毒(human papillomavirus，HPV) 与宫颈癌发病密切相关的假设以来，大量研究表明HPV感染，特别是高危型HPV持续感染是绝大多数宫颈癌前病变和宫颈癌的主要原因[3]。进行HPV DNA检测可提高高级别CIN及宫颈癌的检出率，对细胞学检查结果可疑患者的分类及癌前病变治疗后随访具有重要意义[4]。快速导流杂交芯片可进行HPV分型检测，为当前应用较为广泛的HPV检测技术，临床多与宫颈TCT联合应用。然而，多数HPV感染都是无症状和暂时性的，且大多数新发感染可在2年内消退[5]，这使得HPV DNA检测虽然具有较高的敏感度，但特异度相对较低[6]，意味着HPV DNA检测可能检出过多临床无意义感染，从而增加患者经济负担和心理负担。本研究旨在探讨高危型HPV E6/E7 mRNA检查是否能更好地预测宫颈癌前病变进展，从而为临床筛查及患者随访管理方面提供新方法。

    1 资料与方法

    1.1 临床资料 选取2011年6月—2012年7月因宫颈疾病在天津医科大学一中心临床学院 天津市第一中心医院妇产科就诊的74例患者为研究对象，年龄22～77岁，平均38.1岁。多以接触性出血或异常阴道出血、白带异常、下腹隐痛就诊。均无CIN史、宫颈癌史及盆腔放射治疗史，无子宫全切术史，目前无妊娠，取材前3 d内无阴道冲洗及用药史。所有患者行宫颈TCT、阴道镜下活检组织病理学检查。

    1.2 宫颈样本采集 采用凯普宫颈细胞收集保存系统及专用去RNA酶宫颈细胞保存系统分别采集每例患者宫颈细胞标本共2份，将刷头放入相应的取样管中，取样管内含专用细胞保存液，拧紧瓶盖，室温保存待测。

    1.3 实验器材与试剂 超净工作台、聚合酶链式反应(PCR)扩增仪、HybriMax医用核酸分子快速杂交仪、离心机、水浴锅、移液器；HPV DNA提取试剂盒、PCR扩增试剂盒、HPV DNA杂交试剂盒 ......