贺付成，吕 品，赵 雪，王 玺

    微小RNA(microRNA，miRNA)是一类长度为18～25 nt的内源性单链RNA，可通过降解靶mRNA或抑制其翻译过程来负向调控基因的表达和蛋白的合成，参与多种病理、生理过程[1]。最新研究显示，在不同疾病及病理状态下一些miRNAs的改变可稳定、特异地反映在血清或血浆中[1-2]。miRNA可通过分子生物学方法进行扩增及测定，并作为生物标志物用于多种疾病的诊断、预后判断等研究[3]。有报道显示，miR-21在心肌肥大、心肌缺血及纤维化引起的心脏重构中表达升高，并可调控心肌梗死后血管再生及心肌缺血再灌注引起的心肌细胞凋亡等多种心血管病理过程[4-6]。miR-133a在缺血性心力衰竭、大鼠急性心肌缺血再灌注损伤模型及心肌肥厚病理模型中表达均降低[7-9]，但作为心脏含量最丰富的miRNAs之一，其在急性冠脉综合征引起的心肌损伤患者血浆中表达水平升高[10-11]。本研究旨在观察缺血性心肌病 (ICM)患者血浆中miR-21和miR-133a的表达水平，并探索其在ICM病理生理机制中的意义，为揭示miRNAs在ICM临床诊疗中的价值提供依据。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 选择2012年9月—2013年5月在郑州大学第一附属医院确诊为ICM的患者48例为ICM组，另选择该院健康志愿者30例为对照组。ICM的诊断参照2010年美国心脏协会 (AHA)和美国心脏病学会(ACC)发布的心血管病诊疗指南[12]。入选标准:(1)美国纽约心脏病协会 (NYHA)心功能分级Ⅲ级或Ⅳ级;(2)冠状动脉造影至少1支主要冠状动脉及其分支存在≥50%狭窄性病变;(3)心脏明显扩大及左心室射血分数 (LVEF)≤40%。排除标准:(1)冠心病及其并发症 (室间隔穿孔、乳头肌功能不全等);(2)其他心脏病引起的心脏扩大和心力衰竭 (原发性心肌病、风湿性心肌病、甲状腺功能亢进等);(3)ICM病史不明、恶性肿瘤、急慢性感染、脑血管疾病、自身免疫性疾病、血液系统疾病、严重肝肾功能不全。所有研究对象有知情同意权并经伦理委员会同意。

    1.2 主要试剂及仪器 RNA提取试剂TRI Reagent BD(美国MRC Gene公司产);RT反转录试剂盒、荧光定量PCR试剂盒 (日本TAKARA公司产);Nano-Drop2000c紫外分光光度计 (美国赛默飞世尔公司产);7500 Fast Real-Time PCR仪 (美国ABI公司产);罗氏C8000全自动生化分析仪 (包括罗氏电化学发光试剂盒和罗氏酶比色法试剂盒) ......