程 玉，潘理会，刘海旺，李春辉

    细胞间隙连接通讯 (GJIC)是由相邻细胞间通过间隙连接所介导的一种通讯方式，其通道的主要成分是间隙连接蛋白，其中间隙连接蛋白43(Cx43)是目前研究最广泛的连接蛋白[1-2]。磷脂酰肌醇 3- 激酶(PI3K)存在于细胞质的复合体，是磷脂激酶家族中的重要成员，在磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)信号传导通路中是始动因子，并且在蛋白激酶B(Akt)的激活过程中起着十分重要的作用。PI3K/Akt信号通路的活化可促进细胞的增殖，并促进肿瘤细胞的转移和侵袭[3-4]。本研究通过检测正常胃组织与胃癌组织中Cx43与PI3K的表达，分析胃癌组织中Cx43与PI3K的关系，以探讨细胞间信号传导与细胞内信号传导的作用，从而为探索胃癌的发生机制提供参考依据。

    1 对象与方法

    1.1 研究对象 选取承德医学院附属医院2012年7月—2013年2月行手术切除癌组织的胃癌患者60例，其中男48例，女12例;年龄45～77岁，平均 (58.5±10.0)岁;中～高分化者24例，低分化者36例;无淋巴结转移者25例，有淋巴结转移者35例;Ⅰ/Ⅱ期者28例，Ⅲ/Ⅳ者32例;癌组织穿透浆膜者48例，未穿透浆膜者12例。患者术前均未行放化疗治疗，术后均经病理学检查证实为胃腺癌，且相应癌旁组织均未见有癌细胞累及。

    1.2 试剂与仪器 鼠抗人Cx43抗体 (福州迈新生物技术开发有限公司)，兔抗人PI3K(P85α亚型)浓缩型多克隆抗体 (工作浓度均为1∶100，武汉博士德生物工程有限公司)，反转录聚合酶链反应 (RT-PCR)试剂盒及DNA Marker(大连宝生物工程有限公司)，PCR引物 (北京赛百盛基因技术有限公司设计合成)。Cx43基因上游引物为:5'-TCTCGCCTATGTCTCCTCCTGG-3'，下游引物为:5'-AGTTAGAGATGGTGCTTCCCGC-3'，扩增片段为156 bp;P85α亚型基因上游引物为:5'-TGCTATGCCTGCTCTGTAGTGGT-3'，下游引物为:5'-GTGTGACATTGAGGGAGTCGTTG-3'，扩增片段为175 bp;内参基因 (β-actin)上游引物为:5'-A GCGGGAAATCGTGCGTGAC-3'，下游引物为:5'-ACATCTGCTGGAAGGTGGAC-3'，扩增片段为453 bp。

    1.3 研究方法

    1.3.1 标本采集 收集手术切除的胃癌组织60份，并收集患者距癌边缘10 cm以上的正常胃组织25份 ......