岳红梅，顾 峰，倪志宏，李 佳，高莉萍

    肺癌已经成为一种增长快、死亡率高且发病年龄日趋年轻化的恶性肿瘤。寻找理想的肿瘤标记物 (tumor marker，TM)用于肺癌的早期诊断，并能够早治疗已经成为肺癌患者预后的关键。目前临床诊断肺癌时大多数患者已是中晚期，治疗效果差。因此，寻找新的TM已成为新的研究热点。TM是肿瘤在发生发展过程中由肿瘤细胞自身合成、释放或者由机体对肿瘤细胞反应而产生的一类物质。近年来有研究显示，一种新的TM即膜联蛋白Ⅱ(AnnexinⅡ)在肺癌的发生发展及侵袭转移中发挥着重要作用[1]。但是研究对象多为单一肺癌活检标本，针对AnnexinⅡ在不同标本中的表达少见有报道。本研究对肺癌组织、肺泡灌洗液 (bronchoalveolar lavage fluid，BALF)、胸腔积液中的AnnexinⅡ进行检测，以探讨其在肺癌诊断中的价值。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 收集2010年10月—2011年10月兰州大学第一医院呼吸内科收治的肺癌伴胸腔积液患者60例作为试验组，其中男31例，女29例;年龄40～78岁，平均 (55.0±7.4)岁;均经支气管镜、胸腔积液脱落细胞学检查、胸腔镜检查或术后病理检查等确诊为非小细胞肺癌。同时选取该科室结核性渗出性胸腔积液60例作为对照组，其中男30例，女30例;年龄 33～81岁，平均 (52.0±7.8)岁;经痰抗酸染色找到结核菌3例，其余患者均经胸腔镜病理检查证实。两组患者的性别构成、年龄比较，差异无统计学意义 (χ2=0.017，P=0.855;t=0.000，P=1.000)。

    1.2 主要仪器及试剂 AnnexinⅡ试剂盒 (上海博古生物科技有限公司)，酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂，酶标仪(奥地利TECAN公司，型号:SUNRISE A-5082)、台式高速冷冻离心机 (上海天美生化仪器设备工程有限公司，型号:CT14RD);DAB(ZLI-9017)试剂盒(北京中衫金桥生物技术有限公司)。AnnexinⅡ兔抗人多克隆抗体 (BA0641，上海博士德有限公司)，工作浓度为1∶200;辣根过氧化物酶标记的羊抗兔二抗(12062010，北京康为世纪生物科技有限公司)，工作浓度为1∶100。

    1.3 研究方法及观察指标

    1.3.1 胸腔镜检查 依据2010年《英国胸科协会内科胸腔镜指南》[2]对所有患者进行胸腔镜检查，同时留取胸腔积液用于测定AnnexinⅡ水平。

    1.3.2 肺癌组织的收集、处理及判读肺癌组织来源于试验组患者的蜡块标本 ......