白介素7在原发性干燥综合征患者唇腺组织中的表达及其临床意义
阳性细胞,淋巴细胞,细胞因子,1资料与方法,2结果,3讨论
何春华,张 建,邹 霓原发性干燥综合征(primary Sj?gren′s syndrome,pSS)是一种主要累及外分泌腺体,发病基础是免疫功能紊乱,T、B淋巴细胞活化增殖,产生大量免疫球蛋白和自身抗体的慢性系统性自身免疫病。可同时出现肾脏、肺脏、甲状腺和肝脏等多种器官受累,部分患者可向恶性淋巴瘤发展。人白介素(IL)-7属于促红细胞生成素家族Ⅰ型短链细胞因子,由152个氨基酸残基组成,是一种促进淋巴细胞生成的细胞因子。实验证实IL-7可通过刺激T细胞增殖、分化,维持T细胞存活,诱导单核细胞和B细胞的活化而对淋巴细胞发挥着重要作用[1-2]。目前IL-7在类风湿关节炎[3]、系统性红斑狼疮(SLE)[4]发病中的作用已有较多报道。本研究采用免疫组织化学方法检测pSS患者唇腺组织中IL-7的表达水平,探讨IL-7在pSS发病机制中的作用及临床意义。
1 资料与方法
1.1 临床资料 选择2005年3月—2012年10月滨州市人民医院风湿免疫科门诊及住院的pSS患者30例为pSS组,均符合2002年干燥综合征(SS)欧洲分类标准。其中男2例,女28例;年龄34~70岁,平均(44±19)岁;病程4个月~13年。另选择同时期颌面部创伤和唇腺囊肿患者5例为对照组,其中男1例,女4例;年龄23~53岁,平均(43±17)岁。两组性别及年龄均具有均衡性。
1.2 主要试剂 兔抗人IL-7单克隆抗体(北京博奥森生物技术有限公司)及SP免疫组织化学试剂盒(福州迈新生物技术开发有限公司)。
1.3 免疫组织化学法检测唇腺组织中IL-7的表达 唇腺石蜡组织切片常规脱蜡,过无水乙醇,3%过氧化氢室温下作用10 min;水化后,以pH 6.0的1 nmol/L 柠檬酸钠微波热修复,加封闭血清后,分别加入4 ℃湿盒过夜,再加入链霉卵白素标记的羊抗兔IgG,置湿盒中室温30 min,而后加入与生物素结合的辣根过氧化物酶,室温30 min,二氨基联苯胺(DAB)显色2 min,自来水冲洗,苏木素复染,脱水,中性树胶封片。镜下观察胞质有棕黄色颗粒沉着者为阳性。切片在400倍显微镜下随机选择10个视野(每个视野计数100个细胞),计算阳性着色细胞数百分比,最后求其均值。表达强度采用半定量方法进行评价,标准为:-(没有表达),+(1%~25%),+ +(26%~50%),+ + +(50%以上)。
1.4 HE染色法检测唇腺组织中淋巴细胞浸润情况 按Chisholm标准进行分级:Ⅰ级:1个淋巴细胞浸润灶/4 mm2;Ⅱ级:2个淋巴细胞浸润灶/4 mm2;Ⅲ级:3个淋巴细胞浸润灶/4 mm2;Ⅳ级:4个及以上淋巴细胞浸润灶/4 mm2 ......
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