朱建楠，朱 艳

    宫颈癌是仅次于乳腺癌在世界范围内最常见的女性癌症[1]。全球每年女性癌症新发病例中9%为宫颈癌，8%的女性癌症患者死于该病[2]。目前，已经证实70%宫颈癌的发生与两种高危型人乳头瘤病毒 (human papillomavirus，HPV)——HPV16和HPV18持续感染有关[3]。在临床上对于感染HPV的女性尚缺乏有效的干预治疗。黄芪是多年生草本植物，可增强机体免疫力、保护肝脏、抗衰老和抗菌，可用于癌症的治疗[4]。但对于宫颈癌前病变细胞的作用尚缺乏研究报道。本研究以宫颈永生化上皮细胞 (H8)作为宫颈癌前病变的体外实验研究模型，研究不同浓度黄芪注射液抑制增殖和诱导凋亡的机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞株 H8购自上海拜力生物科技有限公司，用含10%胎牛血清的DMEM/HIGH培养液置于37℃、5%二氧化碳(CO2)的恒温培箱中培养，用0.25%乙二胺四乙酸(EDTA)胰酶消化传代，取对数生长期细胞进行实验。

    1.2 药物 黄芪注射液购自神威药业集团有限公司，生产批号:12120342，10 ml/支 (相当于原药材20 g)。

    1.3 主要试剂 DMEM/HIGH培养基 (赛默飞世尔生物化学制品有限公司)，Bioind优级胎牛血清 (上海创未生物技术有限公司)，Bcl-2、Bax抗体 (北京博奥森生物技术有限公司)，p53抗体 (美国Proteintech Group公司);流式试剂盒(南京凯基生物科技发展有限公司)。

    1.4 仪器 Olympus-LX70倒置显微镜;HEARcel 1150培养箱;超净工作台;中国DNM-9602G酶标分析仪;美国BD公司FACSCalibur流式细胞仪;美国Bio-Rad伯乐043BR119 12半干转印仪;美国Bio-Rad伯乐041BR24044电泳槽;曝光显影系统。

    1.5 四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法 (MTT法)检测黄芪注射液对H8的影响 取对数生长期的H8用0.25%胰酶消化后制成单细胞悬液 ......