艾 婷，周 军，陈 涛，胡 卫，万信念，常俊杰

    乳腺癌是最常见的导致妇女死亡的恶性肿瘤之一，据统计在西方国家，乳腺癌每年的发病率和死亡率在所有妇女癌症中是最高的，且呈逐年增加的趋势，严重威胁女性的健康。预计到2030年，乳腺癌的死亡率将是现在的两倍[1]。中药复方目前仍是中医药防治肿瘤的主流，QHF复方是从具有清热解毒(Q)、活血化瘀 (H)、扶正固本 (F)作用的中药中提取的多个抗肿瘤有效组分，通过文献研究及动物实验，并采用均匀设计法筛选得到的成分组方[2]。前期实验已经表明QHF复方在体内具有良好的抗肿瘤作用，本实验拟进一步研究其体外抗癌作用的效果及可能的机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验材料 人乳腺癌MCF-7细胞系华中科技大学同济医学院惠赠。华蟾素注射液购自安徽金蟾生化股份有限公司，国药准字:Z34020273，批号:120811-3，规格:5 ml/支;20(R)人参皂苷Rg3标准品购自上海源叶生物科技有限公司，批号:20120506，规格:20 mg/瓶;香菇多糖购自南京泽朗植提技术有限公司，规格:1 g/包;注射用血塞通 (冻干)购自昆明制药集团股份有限公司，国药准字:Z20026438，批号:12GA12，规格:400 mg/支;注射用盐酸多柔比星购自浙江海正药业股份有限公司，国药准字:H33021980，批号:012027CF，规格:10 mg/支;DMEM培养基购自美国Gibco公司;胎牛血清购自美国Sigma公司;胰蛋白酶购自上海源叶生物科技有限公司;人血管内皮生长因子酶联免疫分析试剂盒购自上海劲马有限公司。

    1.2 实验方法

    1.2.1 药物的配制 (1)20(R)人参皂苷Rg3原液的配制:用分析天平准确称取10 mg 20(R)人参皂苷Rg3，在超净工作台上加入400μl二甲基亚砜 (DMSO)溶解，加DMEM培养基至10ml，使其浓度为1mg/ml，4℃冰箱保存。(2)三七总皂苷原液的配制:用分析天平准确称取血塞通冻干粉末10 mg，在超净工作台上加DMEM培养基至10 ml，使其浓度为1 mg/Ml，4℃冰箱保存。(3)香菇多糖原液的配制:用分析天平准确称取60 mg香菇多糖，在超净工作台上加DMEM培养基至10 ml，使其浓度为10 mg/ml，4℃冰箱保存。(4)中药QHF复方的配制:按照华蟾素∶人参皂苷Rg3∶三七总皂苷∶香菇多糖=57∶1∶0.4∶7的比例进行配制。QHF浓度从高到低依次命名为:QHF1、QHF2、QHF3、QHF4和QHF5，每次配制3 ml ......