王俊文，李 俊，蔡 伦，张 涛，王和平，王 雷，陈 文，韩 林

    组蛋白去乙酰化酶(histone deacetylases，HDACs)参与细胞信号转导的调控和基因表达，是治疗多种肿瘤性疾病如胶质母细胞瘤的潜在靶点[1-2]，根据其结构特点可分为3类：第Ⅰ类与酵母RPD3同源，包括HDAC1-3及HDAC8；第Ⅱ类与酵母HAD1同源，包括HDAC4-7和HDAC9-11；第Ⅲ类与酵母SIR2同源，命名为SIRT1-7。目前发现Ⅰ类HDACs与肿瘤细胞增殖、分化关系密切，其在多种肿瘤组织中过度表达，如卵巢癌、子宫内膜癌、结直肠癌[2]，但有关Ⅰ类HDACs在星形细胞瘤中表达的研究报道较少，其表达与患者预后间的确切关系尚未明确[3-5]。有研究发现HDAC3可同时在胞核和胞质内表达，其在胞核和胞质内的移位与肿瘤发生、发展密切相关。本研究旨在探讨HDAC3在星形细胞胶质瘤中的表达及其与患者预后的关系。

    1 材料与方法

    1.1 标本收集 选择华中科技大学同济医学院附属同济医院1996年1月—2008年1月收治的283例原发性星形细胞瘤患者和52例复发患者，均经病理检查证实，WHO分级为Ⅱ～Ⅳ级，其中Ⅱ级59例，Ⅲ级26例，Ⅳ级250例；收集其手术切除标本，提取典型病变区域制作成组织芯片(tissue micro-array，TMA)。本研究获得华中科技大学同济医学院附属同济医院临床试验伦理委员会批准。

    1.2 肿瘤细胞培养 采用胰酶消化新鲜肿瘤组织，将消化获得的肿瘤细胞置于37 ℃、5% CO2培养箱内，在含10%胎牛血清培养基(Gibco公司)上培养并传代。

    1.4 荧光定量PCR 提取培养细胞RNA，采用紫外分光光度计检测其纯度并定量；取2 μg RNA样本在20 μl反应体系中进行反转录，再取反转录cDNA产物1 μl在20 μl反应体系中进行PCR扩增。HDAC3上、下游引物序列分别为5′-TCTGGGCTGTGATCGATTG- 3′和5′-CTTGACATATTCAACGCATTCC- 3′；以管家基因PITPNB为内参基因，其上、下游引物序列分别为5′- CGAGACTCAGAAAGAACTAGAAACAA-3′和5′- TGACCCTACAGGGGACTCAT-3′。所有引物由Roche公司合成 ......