王伟文，廖晓阳，杨正辉，林 航，王庆松，吴俞宪，刘 榆

    Dazzi等[1]研究报道，在重复系统给予亚惊厥剂量戊四氮(PTZ)诱发的癫痫模型中，位于前脑皮质、伏隔核及纹状体等区域的细胞外多巴胺神经递质水平明显升高，并且这种内源性多巴胺神经递质的升高与中枢神经元的兴奋毒性有关[2]。DARPP-32(dopamine and adenosine 3′5′-monophosphate-regulated phospho-protein,Mr 32 kD)是多巴胺下游作用的一个重要分子靶点，主要分布于含有D1受体的神经元上，磷酸化DARPP-32(p-DARPP-32)在多巴胺调解包括N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)、γ-氨基丁酸(GABA)等各类兴奋或抑制性神经递质生物学效应方面扮演着中心角色[3-4]。那么，p-DARPP-32在PTZ诱发的癫痫模型中是否介入了癫痫所致的神经元损伤是本研究所探讨的问题。本实验应用免疫酶组织化学及苏木素-伊红染色法研究PTZ诱导的全面性癫痫大发作后DARPP-32在大鼠前脑的磷酸化表达分布情况及其时程变化与嗜酸损伤神经元时程变化之间的可能联系，以探讨p-DARPP-32在实验性大鼠癫痫模型中存在的神经元损伤所扮演的角色。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物 健康成年雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠35只, 体质量210～230 g(第四军医大学实验动物中心提供),置于温暖(20 ℃)、安静环境中饲养48 h。

    1.2 实验分组与模型制备

    1.2.1 实验分组 采用随机数字表法将大鼠分为5个实验组(n=5)和1个对照组(n=10):(1) A组：PTZ 1 h,大鼠在PTZ诱发癫痫发作1 h后被处死，后几组按相应的时间处死；(2) B组：PTZ 6 h；(3) C组：PTZ 24 h；(4)D组：PTZ 48 h；(5)E组：PTZ 72 h；(6)对照组大鼠接受同样体积和次数的0.9%氯化钠溶液腹腔注射，而后在与上述各组相应的时间点被处死，每个时间点2只大鼠。

    本文创新点

    尽管实验动物癫痫模型中将嗜酸神经元作为观察脑神经元凋亡、坏死指标的文献报道很多，但在重复系统给予亚惊厥剂量的戊四氮(PTZ)诱导癫痫持续状态模型中有关嗜酸神经元数量在前脑时程变化的文献报道较少。DARPP-32是多巴胺下游作用的一个重要分子靶点，磷酸化DARPP-32(p-DARPP-32)在多巴胺调解包括N-甲基-D-天冬氨酸(NMDA)、γ-氨基丁酸(GABA)等各类兴奋或抑制性神经递质生物学效应方面扮演着核心角色 ......