赵 爽，郑华川，赵恩宏，郑 鑫，肖丽君,高野康雄

    胃肠道癌是发病率和病死率均较高的恶性肿瘤。虽然最新统计数据表明，世界范围内胃癌的发病率呈降低趋势，但我国胃癌的发病总数占世界胃癌发病总数的47%，在世界范围内结直肠癌的发病率居第三位[1-2]。在胃肠道癌的发生发展过程中，抑癌基因的失活，内环境的改变，凋亡受阻等因素可能起到重要作用。HRPT2基因是一种抑癌基因，其编码的Parafibromin蛋白可与PAF1形成复合体，再通过蛋白-DNA相互作用调控基因转录和翻译，进而诱导细胞凋亡或抑制细胞增殖[3-5]。在人体多种恶性肿瘤中，均发现Parafibromin蛋白表达异常，且与肿瘤的预后密切相关。

    本研究采用大样本量，以免疫组化的方法观察Parafibromin蛋白在胃肠道癌中的表达，旨在探讨Parafibromin蛋白在胃肠道癌发生发展中的作用及与胃肠道癌临床病理特征的相关性，为胃肠道癌预后的判断及临床治疗提供理论和参考依据。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取1997年12月—2008年12月日本富山大学医学部手术切除并经病理证实为胃肠道癌的患者814例，其中男523例，女291例；年龄18～99岁，平均66.3岁；312例伴有淋巴结转移。术前患者均未接受放疗、化疗或生物治疗，均获得患者及其家属知情同意和日本富山大学伦理委员会批准。

    1.2 材料收集 收集所有胃肠道癌患者癌组织标本814份，同时收集胃肠道癌患者癌旁组织标本328份及腺瘤组织标本129份。标本均取自首次切除病灶的患者。

    1.3 主要试剂 Parafibromin鼠抗人多克隆抗体(购自美国Santa Cruz公司)，羊抗鼠单克隆HRP抗体(购自DaKo公司)，抗原修复液、牛血清清蛋白(购自美国Sigma公司)，二氨基联苯胺(DAB)(购自北京中杉金桥生物技术公司)，其余试剂均为国产分析纯。

    1.4 病理学鉴定 组织标本经10%甲醛溶液固定，常规石蜡包埋后切片，切片厚4 μm。HE染色确定其组织学特征；Lauren分型确定肿瘤分化特征；弹性纤维染色和D2-40染色鉴别静脉和淋巴管浸润、UICC分期。同时收集患者肿瘤直径和其余一般临床资料。

    1.5 组织芯片构建 肿瘤组织常规石蜡包埋，HE染色进行形态学观察，核对组织及有关病理诊断，并在组织切片和相应标本蜡块上进行标记。在标记的相应位置用组织芯片取样器(KIN-1，日本AZUMAYA公司)取样，将钻取的组织块放入标记好的24阵列固定塑料框架中注蜡包埋 ......