三氧化二砷联合热疗对食管癌细胞株EC-1放疗的增敏作用研究
培养皿,1材料与方法,2结果,3讨论
谷见法,冯沛贝,路 平食管癌是我国常见的恶性肿瘤,主要的治疗手段是手术和放疗。近年来,食管癌的放疗取得了长足的进步[1],单纯放疗的疗效已与手术效果相当。但有研究显示,食管癌患者单纯放疗后生存期很少能超过3年[2]。这是由于食管癌细胞的放射线抗拒性,同时放疗无法控制肿瘤的远处转移,从而使局部未控制,导致治疗失败。又因食管周围毗邻有心、肺和脊髓等重要脏器,增大照射剂量可使局控率提高,但剂量过大会对患者的这些重要器官造成伤害;同时也存在着诸如远期疗效并不提高、毒性反应较大影响生存质量等问题。因此,寻找有效的放疗增敏疗法及增敏剂,提高食管癌的放射敏感性及局控率,同时尽量减少对正常组织的损伤[3],成为放疗研究的一个热点。本研究旨在探讨三氧化二砷(As2O3)联合热疗对食管癌放疗的增敏作用,现报道如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 细胞和试剂 人食管癌细胞株EC-1由新乡医学院肿瘤反转录分子生物学实验室提供,用含100 U/ml青霉素、100 μg/ml链霉素和10%(V/V)胎牛血清的RPMI-1640培养基,于37 ℃、5%二氧化碳(CO2)孵箱中培养。每24 h更换培养液。每48 h传代1次。As2O3(10 mg/瓶)购自北京双鹭药业股份有限公司。
1.1.2 主要仪器 恒温循环水浴器(HX-1050)(北京博医康实验仪器有限公司);电热恒温水浴箱(HB3V21,Cu600)(上海医疗器械七厂);恒温CO2细胞培养箱(英国RSBionch公司);倒置显微镜(EE 2000-U)(日本Nikon公司),超净工作台(SW-CJ-1F)(苏州净化设备有限公司),6 MV电子直线加速器(德国西门子公司),Epics-XLⅡ型流式细胞仪(美国Beckman Coulter公司) ;显微镜(日本Olympus公司);OLYMPUS直立光照照相系统(日本Olympus公司)。
1.2 方法
1.2.1 平板克隆形成实验检测细胞放射敏感性 实验分组:单纯放疗组(R组)、热疗+放疗组(HR组)、As2O3+放疗组(AR组)、As2O3+热疗+放疗组(AHR组)。每个实验组又接受0、1、2、4、6、8、10 Gy 7种不同剂量的照射。放疗均在室温下照射,电子直线加速器6 MV X线,剂量率为2 Gy/min,照射面积为23 cm×16 cm,源轴距100 cm,培养瓶或培养皿下置1.5 cm组织补偿膜,机架角180°,室温下照射。热疗是将恒温孵育箱温度调至43 ℃稳定1昼夜 ......
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