邱春雷，严 红，吴雄健，刘洪荣

    溃疡性结肠炎(ulcerative colitis，UC)是一种以结肠黏膜弥漫性炎性损害为主要病理特征的消化系统疾病，是一种多因素、病因不清的慢性非特异性炎症性肠道疾病[1]。患者常出现腹痛、腹泻、血便等临床症状，个别患者有时出现贫血或急剧疼痛，发病年龄为20～50岁。国内外流行病学调查结果显示，UC发病率和死亡率均呈明显上升趋势，严重威胁人们的生命健康，已被WHO列为现代难治病之一。至今为止，UC的病因和发病机制尚未明确，尽管对其治疗做了很多研究，但仍未取得满意疗效和突破性进展[2]。大量研究证实，菌群与UC关系密切，肠道菌群失调被认为是UC发生的重要原因之一[3]；实验研究和临床研究均证明肠道益生菌可改善UC患者菌群失调和自身免疫功能，从而缓解或消除肠道炎症[4-5]。本研究通过检测活动期UC(active ulcerative colitis，AUC)和缓解期UC(remissive ulcerative colitis，RUC)患者粪便菌群，观察其微生态学改变及双歧杆菌对UC的治疗作用，探讨UC发病机制。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 选择2011年5月—2013年3月在井冈山大学附属医院门诊就诊或住院的AUC患者64例(AUC组)和RUC患者71例(RUC组)，病程3个月～20年；另选取同期在本院体检健康者30例(对照组)，半年内均未服用过抗生素。AUC组中男33例、女31例，年龄21～57岁；RUC组中男38例、女33例，年龄20～59岁；对照组中男15例、女15例，年龄21～55岁。UC的诊断符合2007年中华医学会消化病学分会炎症性肠病协作组颁布的“对我国炎症性肠病诊断治疗规范的共识意见”中的诊断标准。患者或其监护人、对照者均签署知情同意书。

    1.2 方法

    1.2.1 引物设计与合成 根据双歧杆菌、乳酸杆菌、大肠埃希菌、拟杆菌、普雷沃氏菌、球形梭菌、柔嫩梭菌、肠球菌、柱状真杆菌和普拉梭菌16SrDNA基因序列[6]，利用引物设计软件Primer Premier 5.0设计PCR引物。引物序列均由上海生工生物工程技术服务有限公司合成，各引物序列见表1。

    表1 肠道菌群16SrDNA基因特异性引物序列

    Table1 Species-specific primers sequence of 16SrDNA gene of bacterial group ......