李光荣，宋 敏，杨建波，刘靳波

    鲍曼不动杆菌是一种条件致病菌，其大量存在于医疗环境中，是引起医院感染的主要病原菌。近年来，多重耐药鲍曼不动杆菌(multidrug-resistant Acinetobacter baumannii；MDR-Ab)和泛耐药鲍曼不动杆菌在临床中大量出现，其临床分离率位居我国临床常见革兰阴性杆菌第4位[1]，其感染率、耐药率和临床致死率日益严重，已引起医学界的高度关注。碳青霉烯类抗菌药物是一类新型的小分子、高效、广谱的β-内酰胺类抗菌药物，该药为迄今抗菌谱最广、抗菌活性最强的一类抗菌药物，是治疗多种细菌混合感染及免疫缺陷者感染的一线药物。随着碳青霉烯类抗菌药物的广泛使用，耐碳青霉烯类抗菌药物的鲍曼不动杆菌不断出现并广泛传播[2]。鲍曼不动杆菌产碳青霉烯酶是碳青霉烯类抗菌药物的主要耐药机制之一，其能够水解碳青酶烯类抗菌药物而导致耐药。目前此类水解酶主要是Ambler分子结构分类法中的B类和D类β-内酰胺酶，B类酶又称金属酶，包括IMP型、VIM型等；D类酶又称苯唑西林酶，包括OXA-23、OXA-24、OXA-58 等[3]。为了解鲍曼不动杆菌的耐药性和碳青霉烯酶相关耐药基因的存在情况，本研究对临床分离的88株MDR-Ab进行分析。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 菌株来源 88株MDR-Ab来自2012年1月—2013年5月泸州医学院附属医院收集的临床标本，主要包括痰、分泌物、脑脊液、尿、血液、咽拭子等标本，其中呼吸道标本71株(80.7%)。标本来源科室主要为重症监护病房(ICU)和神经外科。

    1.1.2 主要仪器与试剂 MicroScan WalkAway96全自动微生物鉴定/药敏测试系统购自西门子公司；C1000TM Thermal Cycle PCR扩增仪与GelDoc XR凝胶成像仪购自美国Bio-RAD，PCR引物由上海生物工程有限公司合成；Premix Tag酶体系及DNA Marker-A(GeneRuler 100 bp)购自上海生物工程有限公司。

    1.1.3 引物设计 从Gen Bank中分别获得鲍曼不动杆菌的目的基因OXA-23、OXA-24、OXA-58、IMP、VIM的基因序列全长，特异性引物序列参照文献[4]进行设计(见表1)。

    1.2 方法

    1.2.1 细菌鉴定及药敏试验 88株MDR-Ab使用MicroScan WalkAway96全自动微生物鉴定/药敏测试系统鉴定并获得，同时此系统检测其对氨苄西林-舒巴坦、阿米卡星、头孢曲松、头孢他啶、头孢噻肟、环丙沙星、头孢吡肟、加替沙星、庆大霉素、亚胺培南、左氧氟沙星、他唑巴坦、哌拉西林、复方新诺明、妥布霉素的最小抑菌水平(MIC) ......