通心络胶囊对糖尿病视网膜病变KK/Upj-Ay小鼠血液及视网膜炎性因子表达的影响
1材料与方法,2结果,3讨论
王 超,邢邯英,王 杏,刘 敏,张 哲糖尿病视网膜病变(DR)是临床2型糖尿病患者常见的微血管病变并发症之一,是一种具有特异性改变的眼底病变,其发病率呈逐年上升趋势[1]。DR发生的确切机制仍未明确,有研究表明持续性高血糖、氧化应激、炎性反应、细胞凋亡、血-视网膜屏障受损等因素均会引起DR的病理生理变化;大量文献报道了炎症在DR生成中占有重要地位,随后的研究也确定了DR是一种“炎症疾病”[2]。肿瘤坏死因子α(TNF-α)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、白介素6(IL-6)、白介素1β(IL-1β)等多种炎性因子含量在 DR患者玻璃体、房水、血清中增加,它们之间的相互作用影响了DR疾病的发生发展。本实验采用自发性2型糖尿病KK/Upj-Ay小鼠作为DR小鼠模型,观察通心络胶囊对KK/Upj-Ay小鼠血清及视网膜炎性因子表达的影响,为临床治疗糖尿病微血管病变提供新的用药选择。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 自发性2型糖尿病KK/Upj-Ay小鼠40只,12周龄,雄性,30~40 g;C57BL/6小鼠10只,12周龄,雄性,25~30 g。均购于北京华阜康生物科技股份有限公司,生产许可证号:SCXK-(京)2009-0002。
1.1.2 药物、试剂与仪器 通心络胶囊购于石家庄以岭药业股份有限公司。TNF-α、ICAM-1、IL-6、IL-1β引物由生工生物工程(上海)股份有限公司合成。TNF-α、ICAM-1、IL-6、IL-1β一抗购于Abcam公司。7300 Real-Time PCR System仪购于ABI公司;Biorad凝胶成像分析仪购于Biorad公司。
1.2 方法
1.2.1 小鼠分组 按KK/Upj-Ay小鼠空腹血糖(FBG)水平从低到高排列,然后按照随机数字表法,将小鼠分为模型组、通心络低剂组、通心络中剂组、通心络高剂组,保证各组小鼠平均FBG水平间无差异;另设C57BL/6小鼠为对照组,每组10只小鼠。各组小鼠灌胃给药,通心络低剂组、通心络中剂组、通心络高剂组小鼠分别给予1、2、4 g生药/kg的通心络胶囊,对照组和模型组小鼠灌胃等体积的蒸馏水,1次/d。各组小鼠自由饮食饮水,连续12周。
1.2.2 体质量及FBG测定 每月记录1次小鼠体质量。实验结束后从小鼠眼球取血,测定FBG水平。
1.2.3 血-视网膜屏障功能测定 给药结束,每组取6只小鼠,尾静脉注射50 mg/kg伊文思蓝(EB)溶液。2 h后麻醉小鼠 ......
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