赵君玫，张 娜，王建新，沈晓君，刘学芳

    动脉粥样硬化(AS)是心血管系统最常见的疾病之一，是多种心血管系统疾病主要的病理基础，糖尿病、脂代谢紊乱、高同型半胱氨酸血症等独立的心血管危险因素也被证明部分通过诱导内质网应激(endoplasmic reticulum stress，ERS)而诱发AS[1-4]。内质网是细胞内最重要的细胞器之一，在蛋白质的翻译和加工修饰方面发挥着重要功效，病理情况下内质网蛋白折叠负荷以及处理该负荷能力之间的不平衡导致了ERS，ERS参与AS发生发展的全过程[5-6]。免疫球蛋白重链结合蛋白(binding immunoglobulin protein，BIP)，也称GRP78，是ERS反应途径中的重要分子伴侣，属于热休克蛋白(HSP70)家族成员之一，与内质网内的许多蛋白都有短暂的接触作用，是内质网内环境的灵敏感应器[7]。

    临床研究显示，葛根通脉饮对AS及其所致的心脑血管疾病有一定的治疗作用，为进一步揭示该中药在AS发生发展过程中的作用机制，本研究以ERS信号通路中BIP为切入点，通过高胆固醇、蛋氨酸饮食建立兔高同型半胱氨酸血症诱导的AS模型，观察葛根通脉饮对同型半胱氨酸(Hcy)诱导的兔AS模型的ERS信号通路BIP mRNA和蛋白表达的影响，探讨其可能存在的延缓或治疗AS的作用，为葛根通脉饮抗AS药理学作用提供实验数据和理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料 实验动物：健康日本大耳白兔32只，雄性，普通级，5月龄，体质量2.0～2.5 kg，由河南康达实验动物有限公司提供，许可证号：SCXK(豫)2010-0001。

    试剂：葛根通脉饮(主要成分为葛根、山楂、太子参、当归尾、淫羊藿、赤芍、川芎和甘草)，由河南中医学院制剂室制备。Hcy(Sigma公司产品，25 g /瓶，纯度≥98%，批号：C-7352)。BIP原位杂交检测试剂盒(批号MK3679-rabbit，武汉博士德生物工程有限公司)；BIP：批号3158-1，分子量为78 kD(北京前景科创生物技术有限责任公司)。HRP标记抗鼠二抗：bs0296G-HRP，Lot：130916。HRP标记抗兔二抗：bs0295G-HRP，Lot：019997。BIP地高辛标记的寡核苷酸探针，按 BIP-mRNA 序列，rabbit BIP靶基因的mRNA序列为：(1)5′-GAAAA GAAAA CTAAA CCTTA CATTC AAGTT GACAT-3′；(2)5′-CAGCG TGTCA TGGAG CACTT CATCA AGCTC TACAA-3′；(3)5′-AGGA TTCTG ATTTG AAGAA GTCTG ACATT GATGA-3′；武汉博士德生物工程有限公司提供 ......