何 洁，郝改梅，武志黔，韩 静，吴 晏，薛晓兴，李玉波，王 伟

    ·专题研究·

    活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜病变的影响研究

    何 洁，郝改梅，武志黔，韩 静，吴 晏，薛晓兴，李玉波，王 伟

    目的 观察活血解毒方对糖尿病大鼠视网膜中转化生长因子-β2(TGF-β2)、Smad2及基质金属蛋白酶9(MMP-9)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、Ⅳ型胶原表达的影响，从TGF-β/Smads信号转导通路调控基质代谢的角度探讨活血解毒方改善糖尿病大鼠视网膜病变的可能作用机制。方法 SPF级雄性SD大鼠12只，大鼠适应性喂养1周后，按照随机数字表法选取8只大鼠以65 mg/kg的剂量一次性腹腔注射链脲佐菌素(STZ)，诱导糖尿病模型。剩余4只作为正常组注射等量的柠檬酸钠溶液。1周后尾静脉采血检测血糖，以禁食12 h血糖≥16.7 mmol/L为糖尿病模型造模成功。将8只糖尿病模型大鼠按照拉丁方设计，分为模型组和活血解毒方组，各4只。活血解毒方组给予活血解毒方7.70 g/kg，1次/d，正常组和模型组予以等体积纯净水，持续16周。采用Real-time PCR法检测大鼠视网膜中TGF-β2mRNA及Smad2 mRNA的表达；Western blotting检测MMP-9、MMP-2蛋白的表达；免疫组织化学法检测Ⅳ型胶原的表达。结果 3组大鼠视网膜中TGF-β2mRNA、Smad2 mRNA表达比较，差异均有统计学意义(F=6.232，P=0.034；F=9.518，P=0.014)，其中模型组和活血解毒方组视网膜中TGF-β2mRNA、Smad2 mRNA表达水平均高于正常组；活血解毒方组视网膜中TGF-β2mRNA、Smad2 mRNA表达水平均低于模型组(P1 资料与方法

    1.1 动物 SPF级雄性SD大鼠30只，周龄7周，体质量160～190 g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号SCXK(京)2012-0001。SD大鼠在北京中医药大学实验动物中心SPF实验室饲养，室内温度20～25 ℃、相对湿度50%～60%、换气次数10～15次/h，12 h/d光照维持，昼夜循环。造模前对大鼠进行眼部及全身状况检查，以排除原发疾患，并检测血糖，确保造模前大鼠血糖值均正常。大鼠自由摄食饮水，颗粒饲料喂养，每周监测体质量，每4周检测血糖。动物模型建立前，18只大鼠死亡，共入选12只大鼠。

    1.2 药品与试剂 活血解毒方由鬼箭羽和黄连等组成，由北京中医药大学中药学院制备，使用时制备成0.77 g/ml水溶液 ......