龙 彦，刘 畅，孙媛媛，赵晓涛，王 辉

    ·短篇论著·

    EB病毒急性感染的实验室血清学诊断方法研究

    龙 彦，刘 畅，孙媛媛，赵晓涛，王 辉

    目的 对化学发光免疫分析法(CLIA)测定EB病毒衣壳抗原IgM(EBV-VCA IgM)的结果进行方法学评价，并与酶联荧光分析法(ELFA)、酶联免疫吸附试验法(ELISA)诊断EB病毒(EBV)急性感染的效能进行比较。方法 选取2011年5月—2012年10月北京大学人民医院不明原因发热患者142例，对受试者使用分离胶真空采血管抽取静脉血3 ml，分离血清，采用CLIA、ELFA和ELISA检测EBV-VCA IgM，比较3种方法诊断EBV急性感染的价值；并对CLIA进行方法学评价。结果 CLIA低、中和高值(分别为25.8、81.8、184.4 U/ml)血清标本批内变异系数(CV)分别为5.7%、3.9%和2.6%，批间CV分别为11.4%、5.4%和4.2%。理论值与实测值间的回归方程为Y=0.090 4+1.005 2X，相关系数r=0.998(P1 对象与方法

    1.1 研究对象 选取2011年5月—2012年10月北京大学人民医院不明原因发热患者142例，其中男69例，女73例；年龄3～67岁。EBV急性感染的诊断金标准为同时出现发热、咽峡炎、淋巴结及肝脾大，外周血淋巴细胞数增多，异常淋巴细胞占淋巴细胞总数10%以上或血清嗜异性凝集反应阳性[4]。对受试者使用分离胶真空采血管抽取静脉血3 ml，避免饱餐后采血，以3 000 r/min在离心机中离心3 min，离心半径为10 cm，分离血清，48 h内完成检测者置于4 ℃保存备用，否则置于-20 ℃保存备用。

    1.2 主要仪器及试剂 CLIA采用Liaison全自动CLIA仪(意大利，Diasorin公司)，全封闭配套试剂包括包被有EBV衣壳抗原(p18多肽)的磁性微粒、结合异鲁米诺衍生物的鼠抗人IgM抗体、高值和低值定标液、激发液和缓冲液；ELFA为美国生物梅里埃公司提供的Vidas操作系统及其配套试剂(包被抗原VCA的多肽片段p18多肽)；ELISA法测定EBV-VCA IgM的试剂盒为欧蒙(德国)医学实验诊断股份有限公司产品。

    1.3 检测方法 CLIA测定：测定原理是在磁性微粒表面包被有p18多肽，如果待测血清中含有EBV-VCA IgM，则可与之结合，然后加入异鲁米诺衍生物的鼠抗人IgM的结合物，孵育后洗去未与固相载体结合物。加入激发液启动发光反应 ......