赵 倩，杨 亮，王红丽，王 斌，吴 涛，迪力夏提·金斯汗，吐鲁洪·沙吾列，朱丽萍

    新疆地区不同民族早发性和三阴性乳腺癌易患基因1突变研究

    赵 倩，杨 亮，王红丽，王 斌，吴 涛，迪力夏提·金斯汗，吐鲁洪·沙吾列，朱丽萍

    目的 研究新疆地区汉族和维吾尔族早发性、三阴性乳腺癌易患基因1(BRCA1)基因的突变情况及临床病理特征。方法 选取2012年7月—2014年8月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的早发性(发病年龄≤35岁)、三阴性乳腺癌患者60例，其中汉族30例，维吾尔族30例，运用聚合酶链反应(PCR)和DNA测序检测BRCA1基因突变，并结合临床病理因素进行分析。结果 60例早发性、三阴性乳腺癌患者BRCA1突变率为18.3%(11/60)，其中维吾尔族患者BRCA1突变率为30.0%(9/30)，汉族患者BRCA1突变率为6.7%(2/30)，两者突变率比较，差异有统计学意义(χ2=5.454，P=0.019)。60例患者BRCA1突变的位点共11个，其中8个可引起氨基酸错义突变，2个移码突变，1个拼接点突变。BRCA1基因突变者与无突变者民族、淋巴结转移个数、Ki-67表达情况比较，差异均有统计学意义(P1 资料与方法

    1.1 一般资料 选取2012年7月—2014年8月新疆医科大学附属肿瘤医院收治的早发性、三阴性乳腺癌患者60例，均为女性，年龄22～35岁，中位年龄34岁；维吾尔族30例，汉族30例。入选患者均为首次诊断为原发性乳腺癌，既往无其他肿瘤史、家族史，无化疗、放疗史；排除妊娠及哺乳期乳腺癌患者。入选患者均接受手术或粗针穿刺治疗诊断明确，均签署留取标本的知情同意书，自愿接受检查。本研究获得新疆医科大学伦理委员会批准。

    1.2 实验方法

    1.2.1 DNA提取 使用天根提取试剂盒(型号DP319-02)提取血液标本中基因组DNA(非离心柱型)，使用核酸蛋白定量仪器检测提取的DNA浓度，提取的DNA经过质检并合格后放置于-20 ℃冰箱中保存。

    1.2.2 PCR扩增 根据数据库Genbank(http://www.ncbi.nlm.nih.gov)及文献选取BRCA1基因突变率较高的第10、2、18、5、20号外显子进行研究。由上海生物公司合成PCR引物，引物序列和条件见表1。PCR检测试剂盒由Bio-Rad，USA公司提供，PCR反应液为30 μl，内含合格的DNA提取样本50 ng，95 ℃ 5 min，95 ℃ 30 s，退火温度30 s，72 ℃ 30 s，72 ℃ 5 min ......