张雪娇，梅文莉，蔡彩虹，董文化，姜 北，黄风迎，戴好富

    ·论著·

    毒毛旋花子阿洛糖苷诱导胃腺癌细胞SGC-7901凋亡作用及机制研究

    张雪娇，梅文莉，蔡彩虹，董文化，姜 北，黄风迎，戴好富

    目的 探讨毒毛旋花子阿洛糖苷诱导胃腺癌细胞SGC-7901凋亡作用及其机制。方法 将人胃腺癌细胞SGC-7901分为对照组、0.125 μg/ml组、0.250 μg/ml组、0.500 μg/ml组、1.000 μg/ml组，四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测毒毛旋花子阿洛糖苷对胃腺癌细胞SGC-7901的生长抑制作用，Hoechst染色和Annexin V-FITC/碘化丙啶(PI)流式细胞术检测细胞凋亡情况，JC-1法检测线粒体膜电位变化，Western blotting法检测线粒体途径相关蛋白细胞色素C、Caspase-3和Caspase-9的表达。结果 MTT结果显示，24 h和48 h时不同组胃腺癌细胞SGC-7901吸光度(A)、生长抑制率比较，差异均有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 材料 人胃腺癌细胞SGC-7901购自中国科学院上海生命科学研究院细胞库，RPMI Medium 1640培养基购于Solarbio公司，胎牛血清(PBS)购于四季青生物工程材料有限公司，Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒、Hoechst染色试剂盒(Hoechst Staining Kit)、线粒体分离试剂盒、线粒体膜电位检测试剂盒、细胞色素C抗体、Caspase-3抗体、Caspase-9抗体、环氧酶(COX)Ⅳ抗体、肌动蛋白(Actin)抗体、辣根过氧化物酶标记山羊抗兔IgG(H+L)和辣根过氧化物酶标记山羊抗鼠IgG(H+L)购于碧云天生物技术研究所。

    1.2 细胞培养 人胃腺癌细胞SGC-7901培养于含10%磷酸盐缓冲液(PBS)的RPMI Medium 1640培养基中，置于37 ℃ 5%二氧化碳(CO2)细胞培养箱中培养，0.25%胰酶消化常规传代。

    1.3 四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法(MTT)检测毒毛旋花子阿洛糖苷对细胞的生长抑制作用 将人胃腺癌细胞SGC-7901分为对照组、0.125 μg/ml组、0.250 μg/ml组、0.500 μg/ml组、1.000 μg/ml组，取对数生长期的人胃腺癌细胞SGC-7901接种于96孔板中，培养24 h后，向每孔加10 μl的药液，每组设定6个平行孔，毒毛旋花子阿洛糖苷浓度分别为0、0.125、0.250、0.500、1.000 μg/ml ......