曹国庆，李秀华，武百山，倪家骧

    臭氧可改善氧气供应，增强免疫，释放血红素氧合酶1(HO-1)、热休克蛋白70(HSP-70)，产生超级红细胞，释放干细胞，上调抗氧化酶[1-2]。臭氧自体血治疗是补充性的临床治疗方法，已应用于乙型肝炎、糖尿病、退行性眼病、不同疼痛综合征和缺血性外周血管病的治疗[3]。前期的临床研究显示，臭氧自体血治疗可以有效缓解痛风患者的疼痛，具有镇痛作用，且患者耐受性良好、安全、没有严重不良反应[4]。本研究旨在观察痛风患者经臭氧自体血治疗前后血清免疫球蛋白水平及炎性细胞因子水平的改变，在细胞水平上研究探讨其可能的作用机制。

    1 资料与方法

    1.1 病例入选与排除标准 入选标准:符合2006年欧洲抗风湿病联盟 (EULAR)诊断痛风标准[4]，尿酸>420 μmol/L;急性或慢性痛风男性患者，年龄20～60岁;痛风药物治疗效果不佳或产生严重不良反应;药物治疗有禁忌证。排除标准:不同意臭氧自体血治疗;患心理精神疾病;葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 (G-6PD)明显缺陷;严重的过敏体质;应用血管紧张素转化酶抑制剂治疗;患甲状腺功能亢进症、血小板减少症和严重心血管疾病;严重肾功能损害 (血浆肌酐清除率<30 ml/min)。

    1.2 一般资料 选择2012年6月—2013年9月首都医科大学宣武医院疼痛门诊符合入选与排除标准的痛风患者10例，均为男性，年龄 24～59岁，平均 (41.3±9.9)岁;疼痛性质为触痛、酸痛或胀痛。患者均进行非随机、非盲开放研究，签署书面知情同意书。患者治疗前的一般资料见表1。

    1.3 方法 入室后静脉穿刺，连接输血抗氧化管路，监护仪监测臭氧自体血治疗流程:273 nm分光光度计准确测量臭氧浓度1～100 mg/L，相当于氧气浓度0.1% ～5.0%;抗臭氧的负压瓶内含有3.8%枸橼酸钠20 ml，吸入200 ml静脉血，将所设定浓度的臭氧注入负压瓶与静脉血充分混合后，再回输体内;3次/周，共10次。其中臭氧由医用氧气 (100%)通过德国赫尔曼公司生产的臭氧发生器产生;混合气体中臭氧的浓度为20 mg/L。

    分别采集患者治疗前、第5次治疗后和第10次治疗后的静脉血5 ml。血液静止2 h后以3 000 r/min离心10 min(离心半径为3 cm)，取血清备用，样品在-80℃条件下储存。采用免疫比浊法检测血清IgA、IgM、IgG和补体C3、C4水平;采用流式细胞微球阵列分析方法 (CBA)检测患者IL-8、IL-12和单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)水平 ......