郭 砚，孙 娟，王丽雯

    本研究创新点:

    藏雪莲是高原地区传统的珍贵藏药，被藏族人民视为“圣药”。本研究依据青海省高海拔、强紫外线和缺氧的地理环境，且其居住人群长期暴露于强紫外线环境，易导致皮肤光老化，以人角质形成细胞 (HaCaT细胞)作为研究对象，采用台盼蓝染色观察细胞形态及死亡情况，MTS比色法检测细胞增殖情况，酶标法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽 (GSH)含量、丙二醛(MDA)含量、过氧化氢酶 (CAT)活力，探讨藏雪莲水提取物对中波红斑效应紫外线 (UVB)所引起的HaCaT细胞光老化的保护作用，为青藏高原药材的开发和实际应用提供理论依据，同时为藏雪莲光保护作用机制提供理论基础。

    皮肤老化是人体衰老的一个重要表现，皮肤老化分为两种:一种是固有性老化，一种是由环境因素，如紫外线、吸烟、风吹等引起的外源性老化。皮肤每天均接受来自日光中紫外线的辐射，长期的紫外线辐射导致皮肤发生形态学、组织学和生理学的改变，称之为光老化。阳光中紫外线分为3种:长波黑斑效应紫外线(UVA)(320～400 nm)、中波红斑效应紫外线 (UVB)(280～319 nm)、短波灭菌紫外线 (UVC)(100～279 nm)，UVB是引起辐射损伤的最重要因素，主要损伤皮肤角质形成细胞 (HaCaT细胞)，增加皮肤组织中活性氧 (ROS)的生成量，进而产生超氧阴离子，使细胞内的过氧化氢 (H2O2)大量增多，H2O2分解产生大量自由基，引起一系列的氧化损伤[1]，诱导皮肤光老化的发生。藏雪莲属菊科凤毛菊属雪莲亚属的草本植物，又名雪莲花，是中国西部高山特有的多年生草本植物，具有除湿散寒、通筋活血、强筋助阳的功效，民间多用于治疗风湿性关节炎、妇女小腹冷痛、胎衣不下、闭经、麻痹不透、肺寒咳嗽、高山不适应症等治疗[2]，且有研究证实，藏雪莲水提取物能够增加小白鼠组织内超氧化物歧化酶 (SOD)活力[3]、增加谷胱甘肽 (GSH)含量[4]、降低丙二醛 (MDA)含量[3，5]，从而发挥抗氧化作用。但藏雪莲水提取物对UVB辐射HaCaT细胞抗氧化损伤作用尚未见报道。故本研究主要探讨藏雪莲水提取物对UVB诱导的HaCaT细胞抗氧化损伤作用，为藏雪莲水提取物对UVB光保护作用研究提供理论基础。

    1 材料与方法

    1.1 主要材料和仪器 藏雪莲购自青海众康医药连锁有限公司，HaCaT细胞购自南京凯基生物科技发展有限公司;10%胎牛血清 (FBS)购自Biological Industries，DMEM培养基购自赛默飞世尔生物化学制品 (北京)有限公司 ......