丁 媛，吴秀娟，康晓静，普雄明

    本研究创新点:

    国内外现还未有关于miR-181b-5p与卡波西肉瘤发病机制的相关研究。本研究通过研究miR-181b-5p在人卡波西肉瘤组织中的表达变化及其临床意义，为本病的基因诊断及药物靶标提供理论基础，也对miR-181b-5p在卡波西肉瘤中发病机制的深入研究具有重要意义。

    微小RNA(microRNA，miRNA)是一种长度为18～25个核苷酸的非编码小分子RNA。miRNA在基因转录后通过与靶mRNA互补结合，抑制mRNA的翻译或降解mRNA，发挥对约30%人类蛋白的表达调节作用。迄今为止，已经发现并命名超过9 500个miRNA，分别参与了细胞的生长、分化和细胞周期调控等多个环节，在胚胎发育、神经生物学、病毒学以及肿瘤学等领域已经有了许多成熟的研究[1]。虽然卡波西肉瘤 (Kaposi's sarcoma，KS)组织来源不清，但大多数研究结果还是认为，KS细胞主要来源于血管内皮细胞和周皮细胞，肿瘤组织中可能还存在某种必要的细胞产物以促进内皮细胞的生长[2]。而有研究表明，miR-181b通过调控核因子κB(NF-κB)信号通路作用于靶基因核蛋白α3[3]，最终参与了血管内皮细胞炎症发生的过程。miR-181b-5p是从miR-181b的前体5'端加工而来。miR-181b-5p是否通过复杂的miRNA调控网络导致血管内皮细胞的异常增殖，最终导致肿瘤的发生，还有待于进一步验证。本研究检测miR-181b-5p在人KS组织中的表达，明确miR-181b-5p是否与KS的发生发展相关。

    1 材料与方法

    1.1 材料来源 收集2012年1月—2013年10月新疆维吾尔自治区人民医院18例行HE染色且病理检查明确诊断KS患者的KS组织及癌旁组织 (活检取材)，存于液氮罐中。

    1.2 主要试剂 miRNeasy Mini Kit试剂盒 (德国Qiagen公司)，Trizol试剂 (美国Invitrogen公司)，RNA酶抑制剂、MMLV反转录酶 (美国Epicentre公司)，10×反转录 (RT)缓冲液、2×PCR Master Mix(美国Super Array公司)，2.5 mmol/L脱氧核糖核苷三磷酸(dNTP)混合液 (芬兰HyTest Ltd公司)，RT引物 (上海英骏生物技术有限公司)。

    1.3 研究方法

    1.3.1 提取组织总RNA(含miRNA) 取液氮保存的KS组织及癌旁组织 (50 mg)，按miRNeasy Mini Kit试剂盒说明书提取总RNA ......