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编号:905023
远程缺血预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后脑源性神经营养因子表达的影响
http://www.100md.com 2015年2月22日 中国全科医学 2015年第21期
神经元,阳性,2结果,3讨论
     仝淞铭,曹 阳,于德水,王岩松,魏子健

    ·论著·

    远程缺血预处理对大鼠脊髓缺血再灌注损伤后脑源性神经营养因子表达的影响

    仝淞铭,曹 阳,于德水,王岩松,魏子健

    目的 研究远程缺血预处理(RIPC)对大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCII)后脑源性神经营养因子(BDNF)表达的影响。方法 2014年5—11月,将88只雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=8)、缺血再灌注组(I/R组,n=40)和RIPC组(n=40)。I/R组及RIPC组分别设再灌注0、6、12、24、72 h 5个观察时间点(分别记为1a组~1e组、2a组~2e组),每个时间点8只大鼠。Sham组大鼠只分离肾动脉下腹主动脉,但不阻断;I/R组大鼠采用Zivin法建立SCII模型;RIPC组大鼠双下肢用驱血带短暂缺血10 min,放开10 min,重复2次,30 min后用Zivin法建立SCII模型。取材,苏木素-伊红(HE)染色观察脊髓病理变化,免疫组化法检测BDNF阳性表达细胞数,原位细胞凋亡(TUNEL)法检测细胞凋亡情况,Western blotting法检测BDNF表达水平,并进行大鼠后肢运动功能(BBB)评分。结果 Sham组脊髓未见明显病理学改变,I/R组脊髓病理学改变明显,RIPC组各时间点脊髓病理学改变均较I/R组轻。1a组~1e组、2a组~2e组BDNF阳性表达细胞数、BDNF表达水平均高于Sham组(P1 材料与方法

    1.1 实验材料 健康成年雄性SD大鼠88只,体质量(250±20)g,由辽宁医学院动物实验中心提供。兔抗鼠BDNF抗体购自Santa Cruze公司(美国),山羊抗兔IgG二抗、PV9001通用型Polymer Kit试剂盒、二氨基联苯胺(DAB)试剂盒购自北京中杉金桥生物技术有限公司,原位细胞凋亡(TUNEL)试剂盒购自Roche公司(美国),电子显微镜购自Olympus(日本),切片机购自Leica(德国)。

    1.2 实验方法

    1.2.1 实验动物与分组 2014年5—11月,将雄性SD大鼠按照随机数字表法分为假手术组(Sham组,n=8)、缺血再灌注组(I/R组,n=40)和RIPC组(n=40)。I/R组及RIPC组分别设再灌注0、6、12、24、72 h 5个

    本研究创新点:

    目前关于脑源性神经营养因子(BDNF)的研究主要着重于脑组织,但其在脊髓组织内也有表达。本文通过脊髓缺血再灌注损伤模型来观察BDNF的变化,同时研究在远程缺血预处理情况下BDNF的表达情况 ......

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