孟腾腾，魏 虹，管东方，吴广胜，张志威，齐新宇

    ·论著·

    姜黄素对人早幼粒白血病细胞增殖和凋亡的影响及其机制研究

    孟腾腾，魏 虹，管东方，吴广胜，张志威，齐新宇

    目的 研究姜黄素对人早幼粒白血病细胞HL-60细胞增殖和凋亡的影响及其可能的作用机制。方法 将HL-60细胞设立实验组、阴性对照组、空白对照组，实验组分姜黄素(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 μmol/L)单独亚组和姜黄素(0、5.0、10.0、20.0 μmol/L+30 μmol/L GANT61)联合亚组，于作用24、48 h时观察。采用CCK-8法检测HL-60细胞增殖，计算细胞增殖抑制率；并评价体外联合应用药物对细胞毒性作用是否有协同作用；采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染检测细胞凋亡率。结果 姜黄素单独亚组和姜黄素联合亚组在24、48 h对HL-60细胞的抑制率比较，差异均有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 药物和试剂 GANT61为Selleck公司产品；姜黄素(纯度≥94%)购于Sigma公司；RPMI 1640培养基和胎牛血清为Gibco公司产品；Cell Counting Kit-8(CCK-8试剂盒)购自日本同仁化学研究所(Dojindo)；AnnexinⅤ-FITC细胞凋亡检测试剂盒购自南京凯基生物科技发展有限公司。

    1.2 细胞株及培养条件 HL-60细胞购自中国科学院细胞库。细胞培养采用含10%胎牛血清，1×105U/L青霉素，含1×105U/L链霉素的RPMI 1640培养液，在37 ℃，5% CO2饱和湿度培养箱中培养，每48 h换液传代1次。取生长良好，细胞活性>95%的细胞进行实验。

    1.3 方法

    1.3.1 CCK-8实验分组 将HL-60细胞设立实验组、阴性对照组、空白对照组，每组设5个复孔，实验组分姜黄素(0、2.5、5.0、10.0、20.0、40.0 μmol/L)单独亚组和姜黄素(5.0、10.0、20.0 μmol/L)、GANT61(30 μmol/L)联合亚组，阴性对照组为完全培养基+DMSO+HL-60细胞，空白对照组为完全培养基+DMSO，分别作用24、48 h。

    1.3.2 CCK-8法检测细胞增殖 取对数生长期HL-60细胞，调整细胞密度，按4.5×104/孔接种细胞于96孔板中，24 h后加入上述不同浓度的药物，放入培养箱中孵育到上述各相应时间，每孔加入10 μl CCK-8溶液作用2 h，用酶标仪测450 nm处各孔的吸光度(OD)值 ......