刘小军，杨 琳，潘玉夏，王兴哲，尚银涛，王 茜，杨敬慈，罗建民

    ·论著·

    bcr/abl基因特异性小干扰RNA对K562细胞增殖凋亡和SH2肌醇磷脂酶基因表达的影响研究

    刘小军，杨 琳，潘玉夏，王兴哲，尚银涛，王 茜，杨敬慈，罗建民

    目的 通过小干扰RNA(siRNA)沉默K562细胞bcr/abl基因使SH2肌醇磷脂酶(SHIP)基因表达增加，探讨SHIP基因缺失对K562细胞增殖凋亡的影响及机制。方法 构建bcr/abl基因的化学合成siRNA，并转染到K562细胞，分为转染特异性siRNA实验组、转染非特异性siRNA对照组、空白对照组。Western blotting法检测转染后K562细胞p210表达量,实时荧光定量PCR(FQ-RT-PCR)检测各组细胞中SHIP mRNA表达量；Western blotting法检测SHIP、磷酸化蛋白激酶B 308(p-Akt308)和磷酸化蛋白激酶B 473(p-Akt473)的表达量；MTT比色法检测K562细胞增殖率；流式细胞仪检测K562细胞凋亡率；酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测核因子(NF)-κB活性。结果 转染特异性siRNA实验组K562细胞p210表达量、p-Akt308表达量、p-Akt473表达量较空白对照组和转染非特异性siRNA对照组降低，SHIP mRNA表达量、SHIP表达量、细胞凋亡率较空白对照组和转染非特异性siRNA对照组升高(P0.05)。第1天、第3天、第5天转染特异性siRNA实验组K562细胞增殖率较空白对照组和转染非特异性siRNA对照组降低(P0.05)。第3天、第5天转染特异性siRNA实验组NF-κB活性较空白对照组和转染非特异性siRNA对照组降低(P0.05)。结论 SHIP基因表达受bcr/abl基因的调控，SHIP表达缺失可能是K562细胞过度增殖和凋亡减少的重要因素。

    白血病；基因,bcr/abl；RNA,小分子干扰；细胞增殖；细胞凋亡

    刘小军，杨琳，潘玉夏，等.bcr/abl基因特异性小干扰RNA对K562细胞增殖凋亡和SH2肌醇磷脂酶基因表达的影响研究[J].中国全科医学，2015，18(24)：2934-2938，2945.[www.chinagp.net]

    Liu XJ,Yang L,Pan YX,et al.Effects of siRNA against bcr/abl on expression of SHIP and the proliferation and apoptosis of K562[J].Chinese General Practice ......