壁虎活性单体衍生物腺嘌呤对人肝癌细胞作用的实验研究
培养液,2结果,3讨论
韩 明,程 鑫,赵荣荣,张仕状·论著·
壁虎活性单体衍生物腺嘌呤对人肝癌细胞作用的实验研究
韩 明,程 鑫,赵荣荣,张仕状
目的 探讨壁虎活性单体衍生物腺嘌呤对人肝癌细胞的抑制作用及机制。方法 2014年9月—2015年4月,收集对数生长期的人肝癌Bel-7402细胞进行实验,将96孔板的第2~9列作为腺嘌呤组〔加入腺嘌呤的浓度分别为0.500 00、0.250 00、0.125 00、0.062 50、0.031 25、0.015 63、0.007 81、0.003 91 mg/ml(分别记为A组~H组)〕,第10列作为对照组(加入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液),第11列作为空白组。采用噻唑蓝(MTT)法计算不同浓度腺嘌呤组不同时间(培养24、48、60 h)抑瘤率及腺嘌呤组半抑制浓度(IC50)。将对数生长期的人肝癌Bel-7402细胞分为腺嘌呤组(加入0.500 00 mg/ml的腺嘌呤)和对照组(加入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液),采用透射电镜观察细胞超微结构。将对数生长期的人肝癌Bel-7402细胞分为腺嘌呤组(加入0.500 00 mg/ml的腺嘌呤)和对照组(加入含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液),采用流式细胞仪检测细胞周期。结果 24 h时,B组~H组抑瘤率均低于A组,C组~H组抑瘤率均低于B组,D组~H组抑瘤率均低于C组,E组~H组抑瘤率均低于D组,E组~G组抑瘤率均高于H组(P1 材料与方法
1.1 材料与仪器 人肝癌Bel-7402细胞购自中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库。腺嘌呤(Sigma,美国),RPMI-1640 培养液、胰蛋白酶(Gibco,美国),胎牛血清(Solarbio,中国),噻唑蓝(MTT,Amresco,美国)。CO2培养箱(Thermo,美国),H-7500透射电镜(HITACHI,日本),CKX41倒置显微镜(OLYMPUS,日本),FACSCanto Ⅱ流式细胞仪(美国BD公司)。
1.2 研究方法
1.2.1 细胞复苏与培养 2014年9月—2015年4月,从液氮罐中取出人肝癌Bel-7402细胞,37 ℃水浴中快
本研究背景:
由中药壁虎展开研究,从壁虎中得到抗肿瘤活性单体,经结构鉴定为腺苷。由于腺苷的体内代谢极其迅速,很难制成抗肿瘤药物。根据核苷的结构特点,本课题组对腺嘌呤进行了进一步的研究。腺嘌呤(又称维生素B4)是一种临床应用的升白细胞药物,有望成为一种新的抗肿瘤药物 ......
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