轩亚茹，应 雪，张春春，王亚华，闫荷露，李 霞

    832000新疆石河子市，石河子大学药学院特种植物药资源教育部重点实验室

    ·论著·

    表阿霉素与替莫唑胺联合应用对C6脑胶质瘤细胞增殖及凋亡作用

    轩亚茹，应 雪，张春春，王亚华，闫荷露，李 霞

    832000新疆石河子市，石河子大学药学院特种植物药资源教育部重点实验室

    【摘要】目的探讨表阿霉素(EPI)与替莫唑胺(TMZ)联合用药对C6脑胶质瘤细胞和细胞肿瘤球的增殖抑制及诱导凋亡作用。方法培养C6脑胶质瘤细胞，取对数生长期细胞活性>95%的细胞进行实验。取C6脑胶质瘤细胞接种于96孔细胞培养板中培养，24 h后加入各药液10 μl至细胞培养孔中，细胞培养孔中EPI浓度梯度为0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00 μmol/L，TMZ的浓度梯度为0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、20.0 μmol/L，继续培养24 h和48 h。采用酶标仪在540 nm波长处测定每孔吸光度(OD)值，计算各孔C6脑胶质瘤细胞的抑制率。取C6脑胶质瘤细胞接种于6孔板中，加入EPI、TMZ、EPI+TMZ(EPI终浓度为0.50、1.00、5.00 μmol/L，TMZ终浓度为1.0、5.0、10.0 μmol/L)，继续培养24 h和48 h，经流式细胞仪检测EPI和TMZ联合对C6脑胶质瘤细胞的凋亡作用。培养C6脑胶质瘤细胞肿瘤球，加入EPI、TMZ、EPI+TMZ，EPI终浓度为5.00 μmol/L，TMZ的终浓度为10.0 μmol/L，分别于给药后0、1、3、7 d于倒置显微镜下观察肿瘤球的形态、球体是否有裂解、球核是否有坏死等现象。结果不同浓度的各药物在24、48 h对C6脑胶质瘤细胞增殖的抑制率比较，差异有统计学意义(P95%的细胞进行实验。

    1.3方法

    1.3.1体外抗增殖作用取对数生长期C6脑胶质瘤细胞接种于96孔细胞培养板中，每孔3 000个(含190 μl培养液)，置于37 ℃、5% CO2培养箱中培养。24 h后加入各药液10 μl至细胞培养孔中，每种药液浓度设4个复孔，另设溶剂对照4个复孔。各药液分别为用无血清培养液配制的系列浓度的EPI、TMZ、EPI+TMZ，细胞培养孔中EPI的浓度梯度为0.05、0.10、0.50、1.00、5.00、10.00 μmol/L，TMZ的浓度梯度为0.1、0.5、1.0、5.0、10.0、20.0 μmol/L。将加好各药液的细胞培养板置于培养箱中继续培养24 h和48 h ......