盛冲霄，黎红华，崔 敏，汪志忠，李 敏

    ·论著 ·

    糖尿病与氧化应激在颈动脉粥样硬化大鼠内皮功能障碍中的作用研究

    盛冲霄，黎红华，崔 敏，汪志忠，李 敏

    目的 探讨糖尿病与氧化应激在颈动脉粥样硬化(CAS)大鼠内皮功能障碍中的作用。方法 2014年6—10月选取SPF级健康雄性Wistar大鼠30只，采用随机数字表法分为对照组、CAS组、糖尿病CAS组，每组10只。CAS组、糖尿病CAS组大鼠给予高脂饲料喂养结合维生素D3注射液60万U/kg一次性腹腔注射建立CAS模型。糖尿病CAS组大鼠第5周时给予链脲佐菌素(STZ)45 mg/kg腹腔注射建立糖尿病模型。对照组大鼠给予基础饲料喂养结合0.9%氯化钠溶液腹腔注射。15周后处死大鼠，分离颈动脉，截取约3 mm新鲜颈动脉环，HV-4离体组织器官恒温灌流系统中加入不同浓度(10-9、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L)乙酰胆碱，记录颈动脉环张力(最大舒张度)。苏木素-伊红(HE)染色观察颈动脉组织，免疫组织化学SP法染色并检测颈动脉亲环素A(CyPA)、Kruppel样转录因子2(KLF2)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)平均光密度。结果 HV-4离体组织器官恒温灌流系统中加入不同浓度乙酰胆碱后各组大鼠颈动脉环均出现舒张反应。CAS组、糖尿病CAS组大鼠10-9、10-8、10-7、10-6、10-5、10-4mol/L乙酰胆碱颈动脉环张力较对照组降低(P1 材料与方法

    1.1 实验材料

    1.1.1 实验动物 2014年6—10月选取SPF级健康雄性Wistar大鼠30只，6周龄，体质量180～200 g，由湖北省实验动物研究中心提供，分笼饲养在武汉大学动物实验中心SPF环境中，室内温度(22±1)℃,湿度(60±10)%,自由进食水,光照12 h明暗交替。

    1.1.2 主要实验药剂 维生素D3注射液(上海通用药业股份有限公司，批号：20121002)；胆固醇、胆酸钠(武汉凯润成生物工程有限公司)；兔抗CyPA、KLF2、eNOS抗体(北京索莱宝生物科技有限公司)；免疫组织化学SP试剂盒(武汉博士德生物工程有限公司)；链脲佐菌素(streptozotocin，STZ)(北京索莱宝生物科技有限公司，批号：S0130)；基础饲料由武汉大学动物实验中心提供，高脂饲料(81.3%普通饲料、5.0%蔗糖、10.0%猪油、3.0%胆固醇、0.5%胆酸钠、0.2%丙基硫氧嘧啶)由武汉市万千佳兴生物科技有限公司加工。

    1.1.3 主要仪器 BL-420S生物机能实验系统、HV-4离体组织器官恒温灌流系统、JH-2型张力换能器(成都泰盟科技有限公司) ......