王丽妍，刁宗礼，张启东，张 育，刘文虎

    ·论著·

    Apelin对单侧输尿管结扎小鼠肾脏纤维化的影响研究

    王丽妍，刁宗礼，张启东，张 育，刘文虎

    目的 探讨生物活性肽Apelin对单侧输尿管结扎(UUO)小鼠肾脏纤维化的影响及相关机制，分析在肾脏纤维化时血清和肾脏局部Apelin/APJ系统的代偿性变化。方法 2014年1月选取7周龄雄性C57Bl/6j小鼠共60只,构建UUO的小鼠模型，并设立假手术组(Sham)作为对照。术后每天给小鼠腹腔注射Apelin-13(0.1 μmol/kg)或等量0.9%氯化钠溶液(vehicle)。根据小鼠手术方式和术后用药情况分为4组(15只/组)：Sham+vehicle组、Sham+Apelin组、UUO+vehicle组、UUO+Apelin组。术后2周将小鼠处死，取手术侧肾脏进行检测。采用Masson染色观察肾脏纤维化程度；采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)法检测肾脏细胞外基质胶原〔纤维连接蛋白(Fibronectin)、Ⅰ型胶原(Collagen I)、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)〕表达水平以及肾脏Apelin、APJ表达水平；采用Western blotting法检测肾小管上皮细胞标志物上皮细胞钙黏蛋白(E-cadherin)、间充质细胞标志物α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达水平以及转化生长因子β(TGF-β)/Smads信号通路的主要信号分子(TGF-β1、TGF-βR1、p-Smad2)表达水平；采用ELISA法检测小鼠血清Apelin表达水平。结果 4组小鼠肾脏纤维化程度比较，差异有统计学意义(P0.05)；4组小鼠肾脏APJ、血清Apelin表达水平比较，差异有统计学意义(P1 材料与方法

    1.1 动物模型的建立 2014年1月选取7周龄雄性c57Bl/6j小鼠60只，体质量为(20±2)g，购于中国医学科学院实验动物研究所。饲养环境：温度(22±1)℃,相对湿度(55±5)%的SPF级动物实验室，自由进食水。

    1.2 分组及处理方法 小鼠腹腔注射戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉。UUO组于左侧肾脏近肾门处结扎输尿管，再于输尿管远离肾门处做二次结扎。假手术(Sham)组小鼠行左侧输尿管分离术而不结扎，然后关闭腹腔。术后每天给小鼠腹腔注射Apelin-13(0.1 μmol/kg)或等量0.9%氯化钠溶液(vehicle)。最终根据小鼠手术方式和术后用药情况分为4组，15只/组。Sham+vehicle组：小鼠行左侧输尿管分离术 ......