孙得胜，欧阳瑶，顾延会

    563003贵州省遵义市，遵义医学院附属医院呼吸一科(孙得胜，欧阳瑶，顾延会)；华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科(孙得胜)

    ·论著·

    树突细胞及其相关趋化因子受体在慢性阻塞性肺疾病大鼠肺部的表达变化及其意义

    孙得胜，欧阳瑶，顾延会

    563003贵州省遵义市，遵义医学院附属医院呼吸一科(孙得胜，欧阳瑶，顾延会)；华中科技大学同济医学院附属同济医院呼吸与危重症医学科(孙得胜)

    【摘要】目的 了解树突细胞(DC)及其趋化因子受体CCR6、CCR7在慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠肺部的表达变化，并探讨其意义。方法选用20只清洁级健康Wistar大鼠，采用随机数字表法分为健康对照组(10只)和COPD组(10只)。COPD组使用香烟烟雾刺激和气道内注入脂多糖(LPS)的方法制备COPD模型。第29天取大鼠肺组织，制作病理切片，行HE染色观察其病理学改变；采用免疫组织化学技术检测肺部DC的表达水平，酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中CCR6和CCR7的表达水平。结果COPD组大鼠肺组织HE染色符合COPD典型病理表现，OX(62)和CD(83)的阳性染色均主要表达于细胞的胞质，呈棕黄色。COPD组DC表达水平高于健康对照组，DC表达水平低于健康对照组，差异均有统计学意义(P

    1材料与方法

    1.1实验材料标准实验用清洁级Wistar大鼠(共20只，雄性)，由第三军医大学实验动物中心提供。二步法抗兔/鼠通用型免疫组化试剂盒(上海基因科技公司)，小鼠抗大鼠OX62单克隆抗体(R&D Systems公司)，兔抗-CD83多克隆抗体(北京博奥森生物技术公司)，大鼠CCR6、CCR7酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(上海西唐生物科技公司)，羊抗鼠IgG-HRP(北京爱普华美生物科技公司)，LPS(Sigma公司)，香烟(遵义牌，烟气烟碱量1.2 mg，焦油含量13 mg，烟气一氧化碳量14 mg，贵州中烟工业有限责任公司)。

    1.2模型制备20只大鼠采用随机数字表法分为：健康对照组(10只)、COPD组(10只)。使用香烟烟雾刺激和气道内注入LPS的方法制备COPD模型[9]：COPD组大鼠于第1天和第15天气道内注入LPS溶液(200 μg/200 μl)；第2～28天(第15天除外)于造模箱(由玻璃制成，25 cm×35 cm×80 cm，箱顶有直径约2 cm的通气孔，箱中部从下向上有两排铁网，铁网间摆放并点燃香烟)内被动吸烟(2次/d ......