夏 阳，朱庆超，汪 昱，彭佳远，钱海鑫

    ·论著·

    高脂饮食引发肠道菌群结构改变与结直肠癌发生的相关性研究

    夏 阳，朱庆超，汪 昱，彭佳远，钱海鑫

    200233江苏省苏州市，苏州大学(夏阳)；上海交通大学附属第六人民医院外科(朱庆超，汪昱，彭佳远)；苏州大学附属第一医院外科(钱海鑫)

    【摘要】目的采用高脂饮食干预结直肠癌模型大鼠，观察其结直肠癌发生、发展及肠道菌群结构改变情况，分析高脂饮食引发肠道菌群结构改变与结直肠癌发生的相关性。方法2014年9月—2015年9月，选取4周龄SPF级雄性Wistar大鼠120只，按照随机数字表法分为4组：普通饮食+乙二胺四乙酸(EDTA)非诱导肿瘤组(SDC组)、普通饮食+1,2-二甲基肼(DMH)诱导肿瘤组(SDT组)、高脂饮食+EDTA非诱导肿瘤组(HFDC组)、高脂饮食+DMH诱导肿瘤组(HFDT组)，每组30只。SDC组和SDT组大鼠给予含13.5%脂肪的普通饲料，HFDC组和HFDT组大鼠给予含45.0%脂肪的高脂饲料。SDT组和HFDT组大鼠给予40 mg/kg DMH腹腔注射，1次/周，连续注射10周；SDC组和HFDC组大鼠给予等量的EDTA+0.9%氯化钠溶液腹腔注射。获取大鼠整段结直肠，收集大鼠肠道粪便样本，病理学检查结直肠组织，利用QIAamp DNA Mini Kit试剂盒进行基因组DNA抽提，然后进行基因组DNA鉴定、聚合酶链式反应(PCR)扩增16S rRNA V3可变区，采用焦磷酸测序和生物信息学分析比较高脂饮食与普通饮食干预下肠道菌群结构的差异及其与结直肠癌发生的相关性。结果HFDT组平均结直肠癌数目多于SDT组〔(3.0±0.4)与(2.0±0.4),t=2.143,P=0.038〕。焦磷酸测序结果分析显示，4组大鼠Shannon多样性指数比较，差异有统计学意义(P

    2结果

    2.14组不同时间结直肠癌检出情况第12周即已发现结直肠癌，其中SDT组3只被处死大鼠中1只发现结直肠癌，HFDT组2只发现结直肠癌，SDC组和HFDC组大鼠均未发现结直肠癌；结直肠癌主要集中出现于第14周以后，组织学病理切片检查均证实为腺瘤/癌(见表1)。SDT组和HFDT组大体形态可见结直肠黏膜上出现散在息肉状赘生物，尤以HFDT组还同时合并溃疡状病理损伤。经组织学切片和HE染色证实，肠黏膜上出现的赘生物和溃疡为不同分化程度的结直肠瘤/癌，以腺癌为主要病理类型(见图1、2，本文彩图详见本刊官网www.chinagp.net电子期刊相应文章附件) ......