李杰辉，王 丽，张春霞，狄钾骐，李 辉

    湿润烧伤膏对糖尿病性溃疡大鼠创面组织晚期糖基化终末产物及其受体表达的影响研究

    李杰辉，王 丽，张春霞，狄钾骐，李 辉

    目的探讨湿润烧伤膏(MEBO)干预糖尿病性溃疡创面愈合的作用机制。方法于2015年6月选取145只12周龄的SPF级健康雄性SD大鼠，采用随机数字表法将其分为空白组(35只)和糖尿病模型组(110只)，糖尿病模型组采用腹腔注射链脲佐菌素(STZ)制备糖尿病大鼠模型，8周后选取空白组30只及糖尿病模型组成模大鼠90只，糖尿病模型组成模大鼠再采用随机数字表法分为模型组、MEBO组及贝复济组，每组30只，4组均制备溃疡模型。成功后MEBO组予MEBO纱条、贝复济组予重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液浸透纱条、空白组及模型组予0.9%氯化钠溶液纱条局部换药处理，1次/d。分别于创面干预后第3、6、12天，每次随机选取10只大鼠，观察创面愈合速率；取相同位点创面组织，应用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测晚期糖基化终末产物(AGEs)、核因子κB(NF-κB)水平，荧光PCR技术检测AGE受体(RAGE)mRNA表达水平，HE染色观察创面组织炎性细胞浸润、成纤维细胞及血管生成情况。结果造模8周后，糖尿病模型组体质量低于空白组，血糖水平高于空白组(P1 材料与方法

    1.1实验动物健康雄性SD大鼠145只，12周龄，SPF级，体质量(220±30)g，由广西医科大学实验动物中心提供，许可证号：SCXK桂2009-0002。大鼠饲养于20～25 ℃、相对湿度为(60±10)%环境中，单笼适应性饲养2周后用于实验。

    1.2药品与试剂MEBO(汕头市美宝制药有限公司)，STZ(美国Sigma公司)，重组牛碱性成纤维细胞生长因子外用溶液(贝复济，珠海亿胜生物制药有限公司)，低精蛋白锌胰岛素注射液(江苏万邦生化医药股份有限公司)，Trizol(Invitrogen公司)，PrimeScriptTMⅡ 1st Strand cDNA Synthesis Kit(TaKaRa公司)，Power SYBR? Green PCR Master Mix(ABI公司)，大鼠AGEs、NF-κB p65酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(NeoBiolab公司)。引物设计及合成由中山大学达安基因股份有限公司完成。引物序列如下：RAGE上游引物：5′-GGAATTGTCGATGAGGGGAC-3′，下游引物：5′-CAACAGCTGAATGCCCTCTG-3′；β-actin上游引物：5′-TCCGTAAAGACCTCTATGCC-3′ ......